和Nspl0建立了检测PRRSV非结构蛋白抗体的间接ELISA方法。 mmoUL IPTG诱导后,重组蛋白Nsp9和 目的片段分别克隆到原核表达载体pET-28a(十),经m1 别为27.3kD和31.5 别。 接ELISA方法,并确定了两种间接ELISA反应的最佳工作条件。结果表明,重组蛋白抗原的最 适包被浓度均为01Ixg/mL;待检血清的最适稀释度均为1:40...
根据GenBank中登录的PRRSV Nsp9基因序列,应用Primer Explorer V4软件,在该基因序列中选取保守区设计了4条RT-LAMP引物,旨在建立1种针对Nsp9蛋白基因的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检 测方法.采用引物分组扩增的方法对引物进行了检测,以确保引物的可靠性.对反应体系,温度以及时间进行了优化,检测了该方法的特...
Nsp2 是PRRSV 中最大的非结构蛋白,其大小在不同毒株中不一致,具有免疫原性、高度变异性。Nsp2 区域是分析病毒变异和分子流行病学监测的重要区域,也可能是PRRSV 免疫逃避机制之一。Nsp3 的具体功能尚不明确,研究推出其可与其他非结构蛋白形成复合体,参与病毒的复制。Nsp4 是PRRSV 最重要的蛋白酶,在病毒蛋白表达与...
首先用肺泡巨嗜细胞和MARC-145细胞从临床诊断为PRRSV感染猪的血液,淋巴结等病料中分离到17株病毒,并用既能识别PRRSV欧洲株又能识别PRRSV美洲株单克隆抗体M1对分离的病毒进行鉴定,再用能特异识别PRRSV美洲株NSP2蛋白的单克隆抗体M2和能特异识别PRRSV欧洲株NSP2蛋白单克隆抗体M3对用M1鉴定为阳性的病毒进行分型鉴定,...
不分节段、有囊膜的RNA病毒,病毒粒子大小约为50-70纳米(nanometer,nm),基因组全长为14.9-15.5 kb,含有至少10个开放阅读框(open readingframe,ORF)。ORF1a区域编码非蛋白(non-structural protein,NSP)NSP1α/β至NSP8,ORF1b区域则编码NSP9至NSP12;ORF2a、ORF2b和ORFs3-7,编码与病毒粒子结合的结构蛋白(...
Westernblot分别检测了两个蛋白在感染PRRSV后不同时间点的MARC-145细胞及 PRRSV的天然宿主细胞猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的表达。随后以感染PRRSV MARC-145细胞为样品,通过免疫荧光技术检测了NSP7α和NSP7β及其前体蛋白在细 胞中的分布情况。在Westernblot实验中抗NSP7α的抗血清检测到了与NSP7α大小相近 ...
据研究证实,HP-PRRSV非结构蛋白NSP1α与NSP4分别与参与抗原递呈途径重要的主要组织相容性复合物(Major histocompatibility complex,MHC)I 类分子的重链(SLA-IHC)和轻链(β2M)相互作用,引起细胞毒性T细胞(Cytotoxic T Lymphocytes,CTL)的活化受限,抑制细胞免疫过程。抗原特异性CTL反应通过T细胞受体(T Cell Receptors,TC...
锌指结构对动脉炎病毒基因组RNA的转录有 NSP6复合体、NSP7或NSP6/NSP7复合体 、NSP8共 5个成 重要作用 。番木瓜酶样半胱氨酸蛋白酶区和FMDV的L 熟蛋 白。 蛋 白相似 。具有典型的番木瓜酶样折叠结构,其活性位点 2.4 其他非结构蛋 白研究 是 Cys76和His146~。C端延伸区结合在活性位点区,构成 NSP3有4...
PRRSV基因组由一个15.4 kb大小的有义单链RNA构成,编码至少10个开放阅读框(open reading frame,ORF):ORF1a、ORF1b、ORF2a、ORF2b、ORFs3～7以及新发现的ORF5a[9-10]。病毒体的结构和成分参见文献[11]及模式图1。PRRSV基因组的5′端编码病毒的非结构蛋白(non-structural protein,NSP),3′端编码病毒的结构蛋...
PRRSV是一种小的单股正链RNA病毒，有囊膜，基因组大小约为15.1-15.5kb，至少有8个开放阅读框(ORFs)，编码20个可能蛋白。基因组的5’端和3’端有两个非翻译区(UTR)，具体来说，ORF1(ORF1a和ORF1b)位于5’-UTR的下游，占整个基因组的三分之二以上。ORF1a可直接翻译，ORF1b则需通过核糖体移码进行翻译，...