（3）接种细胞：收集THP-1细胞并进行计数，用诱导培养基重悬细胞沉淀调整细胞密度为5*10^5/mL，将细胞...
初始PMA浓度太高会使一些M2型细胞因子受体上调失败，所以有文献给的是10ng/mlPMA 刺激24小时 ...
2 PMA诱导分化:待THP-1细胞生长至对数生长期时,收集细胞并以1×10^6细胞/mL的浓度重悬于新的培养基中。加入PMA至终浓度为100 nM,轻轻混匀后放回培养箱继续培养。 3 流式细胞术抗体标记:在PMA诱导分化后的特定时间点(如24小时、48小时、72小时),收集细胞并以预冷的PBS洗涤两次。随后,按照抗体说明书推荐的浓...
诱导分化操作精细把控。取对数生长期 THP - 1 细胞,计数后按 1×10⁶个 /mL 密度接种至培养器皿,像 6 孔板、24 孔板等依实验规模选定。加入 PMA 使其终浓度达 20 - 100 ng/mL(常选 50 ng/mL),轻柔摇匀确保均匀分布。随即放回培养箱,24 - 48 小时是关键观察期。期间,细胞形态渐变,由悬浮的圆形单...
首先,我们需要在6孔板里铺细胞。具体来说,每孔加入200万细胞(贴壁后细胞密度大概80%-90%),然后加入80ng/mL的PMA(这个PMA是MCE的HY-18739,用DMSO溶解)。最后,每孔再加2mL完全培养基,然后诱导24小时。 镜下观察 🔬 24小时后,你可以在显微镜下看看细胞状态。你会发现细胞几乎全都贴壁了,有些还成了梭形,胞...
THP-1细胞的极化及鉴定过程如下：将细胞用RPMI 1640完全培养基重悬，加入终浓度为100ng/ml的PMA进行24h诱导分化。随后，将细胞分为两组进行极化：一组加入10ng/ml的LPS和20ng/ml的人类IFN-γ，另一组加入20ng/ml的人类IL-4和20ng/ml的人类IL-13。通过qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等方法对细胞...
首先，准备工作至关重要。确保实验所用的 THP-1 细胞处于良好的生长状态，细胞活性高且无污染。准备适量的 PMA 储备液，一般将 PMA 溶解在 DMSO（二甲基亚砜）中配制成高浓度储备液，以便后续使用。接着进行诱导过程。将 THP-1 细胞接种在合适的培养容器中，如培养瓶或培养板。根据细胞密度和实验需求，加入适量的...
分化诱导剂pma对thp-1源性巨噬细胞膜表面受体md-2表达的影响,分化诱导剂pma对thp-1源性巨噬细胞膜表面受体md-2表达的影响,巨噬细胞分化,thp1 pma诱导..
1.4实验方法 1.4.1 PMA和细胞因子诱导THP-1 细胞定向分化[4,5] 取9×106个正常THP-1于T25培养瓶内,加入终浓度为50 ng/mL的PMA。2 d后细胞进行换液处理,一部分细胞进行流式检测;一部分细胞中加入终浓度均为20 ng/mL的LPS、IFN-γ和IL-6,使细胞向THP-1-M1方向分化;另一部分细胞中加入终浓度均为20 ...
THP-1巨噬细胞极化佛波酯佛波酯诱导THP-1单核细胞系分化为巨噬细胞的模型广泛被使用,目前主要使用高,低浓度两种方案,其是否对M1和M2亚型相关基因的表达有影响鲜有报道.该研究比较了两种常用佛波酯方案对THP-1细胞分化为巨噬细胞及进一步极化为M1和M2亚型过程后相关标志基因的表达情况.结果表明,高浓度佛波酯方案增强...