(2)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)制成诱导培养基;(3)接种细胞:收集THP-1细胞并进行计数,用诱导培养基重悬细胞沉淀调整细胞密度为5*10^5/mL,将细胞种入六孔板,每孔加入细胞悬液2mL;(4)诱导培养:48h后,显微镜下观察巨噬细胞构建成功;(5)...
1. THP-1细胞诱导成M0型巨噬细胞 培养THP-1细胞:将THP-1细胞置于含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培养基中,细胞密度控制在1×10^6 cells/mL左右。 PMA诱导:加入100 nM的佛波酯(PMA, Phorbol 12-myristate 13-acetate),刺激24-48小时,使THP-1细胞贴壁并分化为M0型巨噬细胞。 洗涤:用PBS缓冲液轻轻洗涤细...
为了诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞,通常使用佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸(PMA)。我们实验室使用的PMA浓度为100ng/ml,诱导24~48小时后可以获得M0型巨噬细胞。诱导后的THP-1细胞在表型和功能上与原代人类巨噬细胞非常相似。细胞粘附和扩散是单核细胞(包括原代细胞和THP-1细胞)分化为巨噬细胞的标志。培养基配方:R...
THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)(abs9107)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下:...
将THP-1细胞经PMA诱导为巨噬细胞后,可用RPMI-1640培养基配制氧化修饰低密度脂蛋白OX-LDL,使其终浓度...
通过PMA诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞(Mφ),是在体外研究人Mφ的常用模型。然而,这一模型仍缺乏统一的诱导方法。近期,来自中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所梁米芳和王世文领衔的研究团队,在综合性期刊《PLoS One》发表了一项研究,他们从培养时间、细胞密度、PMA浓度这三方面优化了THP-1细胞分化为Mφ的诱导条件,...
THP-1分化为泡沫细胞 THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后,可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞,这也是动脉粥样硬化产生的原因。 将THP-1细胞经PMA诱导为巨噬细胞后,可用RPMI-1640培养基配制氧化修饰低密度脂蛋白OX-LDL,使其终浓度为80mg/L,加入六孔板中,每孔量为2mL,干预24h ...
成功用 PMA 诱导 THP - 1 分化巨噬细胞,需严格把控各环节。从前期细胞状态、试剂准备,到诱导中的浓度、时长,再到后续精心维护与鉴定,环环相扣,为科研获取高质量巨噬细胞模型,助力免疫学、炎症相关等多领域研究深入开展。
THP-1分化为泡沫细胞 THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后,可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞,这也是动脉粥样硬化产生的原因。 将THP-1细胞经PMA诱导为巨噬细胞后,可用RPMI-1640培养基配制氧化修饰低密度脂蛋白OX-LDL,使其终浓度为80mg/L,加入六孔板中,每孔量为2mL,干预24h。
THP-1细胞的极化及鉴定过程如下:将细胞用RPMI 1640完全培养基重悬,加入终浓度为100ng/ml的PMA进行24h诱导分化。随后,将细胞分为两组进行极化:一组加入10ng/ml的LPS和20ng/ml的人类IFN-γ,另一组加入20ng/ml的人类IL-4和20ng/ml的人类IL-13。通过qRT-PCR、ELISA、流式细胞术等方法对细胞...