10、再次上未染色的样本(空白),设置FITC和PI通道的电压,以使得所有的细胞均位于左下区域。 11、用Annexin V FITC单染的实验样本上机,调节FITC的电压和漏到PI通道的补偿,以便凋亡细胞出现在右下象限。 12、用PI单染的实验样本上机,调节PI的电压和漏...
在接下来的步骤中,PI 是直接添加到膜联蛋白染色细胞液和孵化在黑暗中。孵化后细胞是用离心法在 PBS 洗,用缓冲液冲洗,并存放于冰。现在他们准备进行分析。 Transcript 膜联蛋白 V 和丙啶 (PI) 碘标记的细胞是一种技术用来识别细胞死亡,并区分其不同的途径: 细胞凋亡或程序性细胞死亡和坏死。细胞经历明显的形态...
悬浮细胞的染色:Ⅰ、将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞(0.5×106)用PBS洗2次,加入200μlBinding Buffer和FITC标记的Annexin-V(20ug/ml)10μl及PI(50ug/ml)5μl,室温避光30min,加入400μlPBS,立即用FACScan进行流式细胞术定量检测(一般不超过1小时),同时以不加Ann...
磷 脂可从早期酰丝脂结(早(FI光显PI 和晚期用,降低或者染色脂酰呈 A性(胞呈图右*注意过程 悬浮2 次PI(5术定为阴和分显微操作 注意1、必2、特导致细胞吸至另一脂 酰丝氨酸 外磷脂酰丝氨从细胞膜内侧期阶段,先于丝氨酸来清除结合蛋白,能早期坏死细胞ITC、PE)或显微镜可检测和 Annexin-V碘化丙啶(p期...
PI是核酸染料,不能穿过活细胞膜,当细胞膜出现破损时,PI可进入细胞并结合核酸,Annexin V和PI联用检测细胞凋亡示意图如下: 细胞消化重悬后,加入Annexin V和PI以及染色Buffer,正常细胞不会被Annexin V和PI标记上。 早期凋亡的细胞,膜内侧的磷脂酰丝氨酸外翻(图中粉色结构),此时磷脂酰丝氨酸会和Annexin V结合。 晚期凋...
用绿色荧光探针 CL488 标记的 Annexin V,即 CL488-Annexin V,可以结合外翻的磷酯酰丝氨酸,从而检测凋亡早期的细胞。CL488 染料与荧光素/FITC 相比,荧光亮度更高,且不受环境中 pH 的影响,具有良好的光稳定性。 碘化丙啶(Propidium lodide, PI)是一种 DNA 结合染料,它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜...
1.4 流式PI 染色法 收集培养液和消化下来的细胞离心,调整细胞浓度为1×106,加入75%冰乙醇固定,放于4℃冰箱过夜,离心、洗细胞出去乙醇后,加入事先配好 1mL PI 染液,4℃避光30 min,上流式细胞仪检测。 1.5 流式Annexin V/PI 法 以1: 4 稀释binding buffer (50mL buffer +150mL 蒸馏水),在稀释的buffer...
回答者:网友 你的阴性对照就是无任何染色的细胞。 PI阳性对照,可以固定过的死细胞,可以保证都是PI阳性 Annexin阳性的细胞,用trypsin消化时间长一点(比如消化10分钟),大曲胡部分也是阳性的。这个来自也从一个侧面反映出根城心欢味容诗子海批能该方法(Annexi重而n V+PI)的非特异360问答性很高。 ...3571我...
1、金锄头文库是“C2C”交易模式,即卖家上传的文档直接由买家下载,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的收益全部归上传人(卖家)所有,作为网络服务商,若您的权利被侵害请及时联系右侧客服; 2、如你看到网页展示的文档有jinchutou.com水印,是因预览和防盗链等技术需要对部份页面进行转换压缩成图而已,我们并不...
将Annexin V进行荧光素（EGFP、FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用...