在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。FITC通道 推荐染料:FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料...
4. PE-Cy5:PE-Cy5是一种复合染料,属于藻红蛋白偶联物,在此类复合染料中,激发能量可从PE传递到Cy5上,最大发射波长为667 nm。由于PE-Cy5与FITC、PE在光谱上重叠范围较少,荧光干扰少,因此实验中常将PE-Cy5与FITC、PE搭配使用。需注意,PE-Cy5不适合与APC搭配使用,两者荧光重叠大。5. PE-Cy5.5:PE-C...
应用:FITC通道常用于标记细胞表面的抗原或细胞内的某些成分,如CD4、CD8等T细胞标志物的标记。 PE通道 推荐染料:PE(藻红蛋白)是一种橙黄色荧光染料,其激发波长为565nm左右,发射波长为575nm左右。在PE通道中,除了PE本身外,还可以选择其他橙黄色或红色光谱范围内的荧光染料,但需确保它们不会与FITC或APC通道产生严重的...
1).FITC(Fluorescein)又称异硫氰酸荧光素,其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;FITC 的最大发射波长为525nm,在流式细胞仪的FL1通道检测。 2).PE(R-Phycoerythrin)又称藻红蛋白,有R-PE和RD1的别称,其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;PE 的最大发射波长为575n...
荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375nm、405nm、488nm和633nm四类。其中,常用的是激发波长为488nm和633nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 激发波长为488nm的荧光素 01 异硫氰酸荧光素 Fluorescein isothiocyanate,FITC是应用最为广泛的一种荧光素,经激光激发后发出明亮的黄绿色荧光,最大发射波长为525...
bd流式细胞仪c6 fitc/pe/apc哪个通道(1)|流式细胞仪 流式细胞仪数据分析 5.1 数据采集及显示 光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号。 流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中,而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢?l调节电压l检测荧光通道的自发荧光l每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照?l细胞l补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选,但是当细胞数量...
以FITC-PE为例。在散点图上,划分为四个象限。如果纵坐标是FITC, 横坐标是PE。调节电压后,阴性的细胞位于左下象限。这是可以得出阴性细胞横坐标(PE)和纵坐标(FITC)的平均荧光强度值。电压调好以后,上单色阳性样本。比如上牌FITC阳性,这时不要再改变电压了,而是调节补偿系数,最终目的就是让...
根据FSC标准,数据存储格式应包括三个文件:样本获取文件,数据设置文件和数据分析结果。 4参数(FSC,SSC,FITC和PE)的单细胞分析会生成8位数据。当单个样品累计收集到10000个细胞时,FCS数据文件为80kB. 数据采集存储完毕后,细胞亚群可以几种不同格式显示。单参数如FSC或FITC(FL1)可使用直方图,横轴表示荧光通道。纵轴表示...
做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC, PE, PerCP还有APC单分直太染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代,你需要画出这四个颜色两两配对的散点图,比如FITC-PE, FITC-PerCP, FITC-APC, PE-PerCP,PE-APC, PerCP-APC,这一共6个散点图。然后,先上未染色的样本,调节...