PE可被两个波长段的光所激发,如图2所示,图2下方第二个波长段的光谱分布图更明显地提示了这个异常现象。 图2. PE的激发情况被FITC更复杂,它有两个激发最大值:一个大约在488nm,一个大约在561nm。有趣的是,在561nm激发时,部分发射光...
在流式细胞术或荧光标记实验中，FITC（异硫氰酸荧光素）、PE（藻红蛋白）和APC（别藻青蛋白）是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长，因此在选择染料进行配色时，需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配，并尽量减少荧光溢出和补偿问题。FITC通道 推荐染料：FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料...
荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记最常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)、藻红蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。 异硫氰酸荧光素 ( FITC) 异硫氰酸荧光橙红,异硫氰酸...
1. 先调节阴性对照管,将原补偿清零。调节电压,使阴性群落在FITC和PE双阴性区。 2. 进行FITC单染管调节。在理想情况下,检测管中不应该出现PE信号。但在实际情况中,可能在FITC与PE的双阳性区出现荧光信号。这个信号是PE探测器检测到的FITC信号。此时,需要通过...
在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。
流式实验的三大要素是样本（细胞或颗粒）、流式细胞仪和荧光素偶联抗体，进而讲到了荧光素的选择问题，常见荧光素的特点。荧光素按激发光波长来分，主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类，其中，常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素，如FITC、PE、APC、PI等。激发波长为488 nm的荧光素...
一、PEFITC调补偿的步骤 在流式细胞术中,PE和FITC是两种常用的荧光染料,用于标记和检测细胞表面的抗原。为了准确测量荧光信号,需要进行补偿调节,以排除不同荧光通道之间的光谱重叠。PEFITC调补偿的步骤如下: 先调节阴性对照管,将原补偿清零。调节电压,使阴性群落在FITC和PE双阴性区。 进行FITC单染管调节。在理想情...
一、PE-FITC补偿的原理 在流式细胞术中,荧光素的荧光信号需要通过滤光片进行探测。然而,不同荧光素的荧光信号并不只局限在特定的波长范围内,会出现荧光重叠的情况。例如,探测FITC荧光信号时,PE通道也会探测到部分FITC信号,这就是FITC溢出到...
Fluorescein isothiocyanate,FITC是应用最为广泛的一种荧光素,经激光激发后发出明亮的黄绿色荧光,最大发射波长为525nm。FITC的荧光强度受PH影响较大,常随着PH的降低而减弱。因此,在使用FITC时需格外注意溶液的酸碱度。 02 藻红蛋白 Phycoerythrin,PE是从红藻中分离纯化获得的一种常见染料,经激光激发后发出橙黄色荧光,...
1).FITC(Fluorescein)又称异硫氰酸荧光素,其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;FITC 的最大发射波长为525nm,在流式细胞仪的FL1通道检测。 2).PE(R-Phycoerythrin)又称藻红蛋白,有R-PE和RD1的别称,其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪;PE 的最大发射波长为575...