应用:FITC通道常用于标记细胞表面的抗原或细胞内的某些成分,如CD4、CD8等T细胞标志物的标记。PE通道 推荐染料:PE(藻红蛋白)是一种橙黄色荧光染料,其激发波长为565nm左右,发射波长为575nm左右。在PE通道中,除了PE本身外,还可以选择其他橙黄色或红色光谱范围内的荧光染料,但需确保它们不会与FITC或APC通道产生...
因为 Cy5的激发波长与 APC 的激发波长相近,所以 PE-Cy5 荧光素中的 Cy5,也会被激发 APC 的第二个激光器(氦氖激光器)所激发,导致 PE-Cy5 与 APC 的颜色补偿很难调。相反,PE-Cy5.5 中的 Cy5.5 激发波长为675nm,不能被激发 APC 的第二个激光器所激发,也就不存在 Cy5.5 对 APC的干扰,颜色补偿也就很...
4. PE-Cy5:PE-Cy5是一种复合染料,属于藻红蛋白偶联物,在此类复合染料中,激发能量可从PE传递到Cy5上,最大发射波长为667 nm。由于PE-Cy5与FITC、PE在光谱上重叠范围较少,荧光干扰少,因此实验中常将PE-Cy5与FITC、PE搭配使用。需注意,PE-Cy5不适合与APC搭配使用,两者荧光重叠大。5. PE-Cy5.5:PE-C...
左下象限(LL)为双阴性细胞,左上象限(UL)为Y轴阳性细胞(CD19 PE),左下象限(LR)为X轴阳性细胞(CD3 FITC),右上象限(UR)为双阳性细胞(CD19+/CD3+)。 图5-6 阴性对照组(NORM001)和CD3 FITC/CD19 PE双染样本(NORM002) 如图5-7所示,淋巴细胞亚群双阳性细胞(CD19+/CD3+)的百分含量为:296/2839=10.43%...
荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375nm、405nm、488nm和633nm四类。其中,常用的是激发波长为488nm和633nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 激发波长为488nm的荧光素 01 异硫氰酸荧光素 Fluorescein isothiocyanate,FITC是应用最为广泛的一种荧光素,经激光激发后发出明亮的黄绿色荧光,最大发射波长为525...
应用:PE通道常用于标记细胞表面的其他抗原或进行多色流式细胞术中的另一种颜色区分。 APC通道 推荐染料:APC(别藻青蛋白)是一种红色荧光染料,其激发波长为630nm左右(也有说法为660nm),发射波长为660nm左右(也有说法为675nm)。在APC通道中,应选择红色光谱范围内且光谱特性与APC相匹配的荧光染料。
做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC, PE, PerCP还有APC单染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代,你需要画出这四个颜色两两配对的散点图,比如FITC-PE, FITC-PerCP, FITC-APC, PE-PerCP,PE-APC, PerCP-APC,这一共6个散点图。然后,先上未...
流式细胞术怎么调节荧光补偿FITC/PE/PerCP/APC网友 1 最佳答案 回答者:网友 流式细胞术中荧光补偿该如何调节?以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中,而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢?l调节电压l检测荧光通道的自发荧光l每个荧光通道做单染管...
PE-Cy5 PE-Cy5是一种复合染料,属于藻红蛋白偶联物,在此类复合染料中,激发能量可从PE传递到Cy5上,最大发射波长为667 nm。由于PE-Cy5与FITC、PE在光谱上重叠范围较少,荧光干扰少,因此实验中常将PE-Cy5与FITC、PE搭配使用。需注意,PE-Cy5不适合与APC搭配使用,两者荧光重叠大。
补偿调节时要注意:l使用未染色的细胞做PMT的电压设置l不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球:OneCompeBeads与UltraCompeBeads。微球大小和淋巴细胞相当,可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群:一群是可以结合抗体的阳性群,一群是不会与抗体反应的阴性群。优...