做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC, PE, PerCP还有APC单染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代,你需要画出这四个颜色两两配对的散点图,比如FITC-PE, FITC-PerCP, FITC-APC, PE-PerCP,PE-APC, PerCP-APC,这一共6个散点图。然后,先上未染色
补偿调节时要注意:l使用未染色的细胞做PMT的电压设置l不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球:OneCompeBeads与UltraCompeBeads。微球大小和淋巴细胞相当,可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群:一群是可以结合抗体的阳性群,一群是不会与抗体反应的阴性群。优...
补偿调节时要注意:l使用未染色的细胞做PMT的电压设置l不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球:OneCompeBeads与UltraCompeBeads。微球大小和淋巴细胞相当,可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群:一群是可以结合抗体的阳性群,一群是不会与抗体反应的阴性群。优点:l使用方便,一...
5. PE-Cy5.5:PE-Cy5.5也是一种复合染料,能量从PE传递到Cy5.5上,最大发射波长为694 nm。同PE-Cy5不一样,PE-Cy5.5与FITC、PE、APC间荧光干扰小,可搭配使用,且其荧光强度要优于PE-Cy5。6. PE-Cy7:复合染料,最大发射波长为785 nm。PE-Cy7与FITC无光谱重叠,与APC重叠也较少,因此其可与FITC、...
做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC,PE,PerCP还有APC单染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代,你需要画出这四个颜色两两配对的散点图,比如FITC-PE,FITC-PerCP,FITC-APC,PE-PerCP,PE-APC,PerCP-APC,这一共6个散点图。然后,先上未染色的样本,调节各个荧光通道的...
做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC, PE, PerCP还有APC单染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代,你需要画出这四个颜色两两配对的散点图,比如FITC-PE, FITC-PerCP, FITC-APC, PE-PerCP,PE-APC, PerCP-APC,这一共6个散点图。然后,先上未染色的样本,调节各个...
在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。FITC通道 推荐染料:FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料...
在流式细胞术或荧光标记实验中,FITC(异硫氰酸荧光素)、PE(藻红蛋白)和APC(别藻青蛋白)是三个常用的荧光通道。每个通道都有其特定的激发和发射波长,因此在选择染料进行配色时,需要确保所选染料的光谱特性与通道相匹配,并尽量减少荧光溢出和补偿问题。
单阳管即单染管,是只添加一种荧光抗体的样本管。一般来说,实验panel有几种荧光,就需要设置几个单阳管。如:APC、PE、FITC的三色panel,需要设置三个单阳管。制备单阳管的要求 1单阳管和全染管的样本类型、荧光素要保持一致;2单阳管和全染管的样本处理要相同,如:全染管进行了固定破膜处理,单阳管...
PE-Cy5是一种复合染料,属于藻红蛋白偶联物,在此类复合染料中,激发能量可从PE传递到Cy5上,最大发射波长为667nm。由于PE-Cy5与FITC、PE在光谱上重叠范围小,荧光干扰少,因此实验中常将PE-Cy5与FITC、PE搭配使用。需注意,PE-Cy5不适合与APC搭配使用,两者的光谱重叠范围大。