求教FITC PE APC免疫荧光共染网友 1 最佳答案 回答者:网友 我还是觉得采用激光共聚焦的顺序扫描应该可以完全解决串色干扰的问题。至于颜色,可以自己调节。 如果你的共聚焦显微镜的荧光染料库里没有你所用给的染料,简单的办法就是选择跟你的染料的最接近的染料,而不是随便就选择一个。 如果共聚焦显微镜的配置有光谱拆分的话,就
FITC通道 推荐染料:FITC本身就是一种常用的绿色荧光染料,其激发波长为495nm左右,发射波长为515nm左右。此外,其他在绿色光谱范围内且能与FITC通道兼容的荧光染料也可以考虑,但需注意避免光谱重叠导致的荧光溢出。 应用:FITC通道常用于标记细胞表面的抗原或细胞内的某些成分,如CD4、CD8等T细胞标志物的标记。 PE通道 推荐...
5. PE-Cy5.5：PE-Cy5.5也是一种复合染料，能量从PE传递到Cy5.5上，最大发射波长为694 nm。同PE-Cy5不一样，PE-Cy5.5与FITC、PE、APC间荧光干扰小，可搭配使用，且其荧光强度要优于PE-Cy5。6. PE-Cy7：复合染料，最大发射波长为785 nm。PE-Cy7与FITC无光谱重叠，与APC重叠也较少，因此其可与FITC、...
所以尽量选择光谱重叠小的荧光素,如 FITC/PE-Cy7;选择不同激光激发的荧光素,如 FITC/APC, PE/APC。 d). 尽量避免偶联染料使用带来的假阳性偶联荧光染料是指两种荧光素联接在一起进行荧光共振能量转移。供方荧光素如 PE,APC 或 Brilliant Violet 421TM 被激光激发,然后通过共振将能量转移给受体荧光素,如 PE-Cy...
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中，而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢？l调节电压l检测荧光通道的自发荧光l每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照？l细胞l补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选，但是当细胞数量...
图5-6 阴性对照组(NORM001)和CD3 FITC/CD19 PE双染样本(NORM002) 如图5-7所示,淋巴细胞亚群双阳性细胞(CD19+/CD3+)的百分含量为:296/2839=10.43%. 图5-7 散点图统计结果 另一个分析方法是划定区域,也就是设门。我们可以用不同形状的绘图工具定义所选区域(如图5-8所示);然后统计该区域内指定细胞亚群...
做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC， PE， PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE， FITC-PerCP， FITC-APC， PE-PerCP，PE-APC， PerCP-APC，这一共6个散点图。然后，先上未...
PerCP英文全名:peridinin chlorophyll protein,中文名:多甲藻叶绿素蛋白;最大激发波峰490nm,被488nm的氩离子激光激发后,发射光峰值约为677nm,与FITC、PE进行多色荧光染色补偿重叠较少,非特异性结合也较少。虽然较易使用,但量子产量不高,多用于检测表达较高的抗原。...阅读全文 在血常规...
1. 实验样本是否带荧光,因为感染病毒或质粒转染的细胞往往带GFP荧光,GFP与YF488/FITC通道重叠,不能选择YF488/FITC标记的Annexin V,此时如果只有488 nm一根激光管可以用PE标记Annexin V,用7-AAD代替PI,若有633 nm激光管,可以改用YF647 Annexin V代替YF488。 2. 如果流式细胞仪带有488 nm和633 nm两个或以上激...