载体构建与转染构建人PD-L1真核载体的核心步骤为将PD-L1基因序列克隆入pIRES2-EGFP载体中,该载体包含GFP荧光标记基因,便于后期筛选。载体构建后,使用威尼德电穿孔仪进行电转染,优化电转染参数以提高转染效率。转染后,细胞在筛选压力下培养,以保证稳定转染细胞的扩增。稳定转染细胞的筛选与扩增转染后的细胞在加入适...
因此,选择了0.3 mol%肽浓度的Pep LNP进行后续实验(图2f,g)。 随后表征发现,Pep LNP具有球形形状,EGFP mRNA的包封率为96.4%。在稳定性评估中,发现在 4°C 下保存14天后,EGFP/Pep LNP对CT26.CL25细胞转染效率开始略有下降,直到第3...
构建人PD-L1真核载体的核心步骤为将PD-L1基因序列克隆入pIRES2-EGFP载体中,该载体包含GFP荧光标记基因,便于后期筛选。载体构建后,使用威尼德电穿孔仪进行电转染,优化电转染参数以提高转染效率。转染后,细胞在筛选压力下培养,以保证稳定转染细胞的扩增。 稳定转染细胞的筛选与扩增 转染后的细胞在加入适当浓度的选择性抗...
2、探究外泌体摄取途径:WB和共聚焦成像结果表明,相较于CDE(小窝蛋白介导内吞作用)抑制剂,Exo-PD-1-EGFP进入细胞能够被CME(网格蛋白介导内吞作用)抑制剂抑制,初步认为,CME可影响Exo-PD-1的摄取。3、进一步研究CME途径:流式细胞术结果显示,在给予CME抑制剂后,PD-L1的表达量增多,对比未给予抑制剂,PD-1/PD-L1...
pCDNA3.1-EGFP-PD-L1(胞外段) pCDNA3.1-EGFP-PD-L1(胞外段) pCDNA3.1-EGFP-PD-L1(胞外段) 测序及更多信息: 点击联系我们微信/QQ:1822235623上海海吉浩格生物科技有限公司http://www.hedgehogbio.com 上海海吉浩格生物科技有限公司 http://hedgehogbio.com测序及更多信息: 点击联系我们QQ:1822235623 微信:18222...
图1f和图1g示出借由免疫荧光染色和流式细胞术检测用500nmpma处理的egfp-pd-l1l8057细胞中的cd42a(比例尺:10μm)。图1h示出pd-l1mk细胞经历成熟和分化的不同阶段(比例尺:10μm)。i:成熟egfp-pd-l1mk细胞;ii:前血小板从mk细胞的出芽;iii:前血小板从mk细胞的延伸;iv:前血小板从mk细胞的释放。图1i示出从...
通过抑制SDF-1诱导的CXCR4-EGFP再分布,作者检测了纳米复合物对CXCR4的拮抗作用。发现与阳性对照组比较,FX以及FX@HP显示出类似的CXCR4拮抗作用,而PEI没有拮抗CXCR4的作用(图2A)。对于抗PD-L1治疗,在体外检测纳米复合物对LLC细胞的PD-L1沉...
载体构建与转染构建人PD-L1真核载体的核心步骤为将PD-L1基因序列克隆入pIRES2-EGFP载体中,该载体包含...
[图1]大鼠抗牛pd-l1抗体6c11-3a11的结合特异性。虽然大鼠抗牛pd-l1抗体6c11-3a11未与egfp表达细胞结合,但与犬pd-l1-egfp表达细胞发生了特异性结合。 [图2]大鼠抗牛pd-l1抗体6c11-3a11的预测的cdr区域。示出了大鼠抗牛pd-l1抗体6c11-3a11的轻链可变区及重链可变区中的cdr1、cdr2及cdr3区域。
目的构建程序性死亡配体-1(PD-L1)重组腺病毒载体,以期 用于体内实验研究.方法酶切含有小鼠全长PD-L1 cDNA的pcDNA3.1/PD-L1质粒,亚克隆到穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细胞内和AdEasy-1同源重组,筛选阳性 克隆,酶切、测序鉴定正确,线性化后脂质体法转染293细胞进行包装、扩增,利用报告基因EGFP对病毒滴度进行监测...