因此,选择了0.3 mol%肽浓度的Pep LNP进行后续实验(图2f,g)。 随后表征发现,Pep LNP具有球形形状,EGFP mRNA的包封率为96.4%。在稳定性评估中,发现在 4°C 下保存14天后,EGFP/Pep LNP对CT26.CL25细胞转染效率开始略有下降,直到第3...
图1f和图1g示出借由免疫荧光染色和流式细胞术检测用500nmpma处理的egfp-pd-l1l8057细胞中的cd42a(比例尺:10μm)。图1h示出pd-l1mk细胞经历成熟和分化的不同阶段(比例尺:10μm)。i:成熟egfp-pd-l1mk细胞;ii:前血小板从mk细胞的出芽;iii:前血小板从mk细胞的延伸;iv:前血小板从mk细胞的释放。图1i示出从...
说明PD-1与PD-L1结合可介导外泌体运输。 2、探究外泌体摄取途径:WB和共聚焦成像结果表明,相较于CDE(小窝蛋白介导内吞作用)抑制剂,Exo-PD-1-EGFP进入细胞能够被CME(网格蛋白介导内吞作用)抑制剂抑制,初步认为,CME可影响Exo-PD-1的摄取。 3、进一步研究CME途径:流式细胞术结果显示,在给予CME抑制剂后,PD-L1...
本发明提供一种PDL1靶向的重组溶瘤腺病毒及其应用.该病毒(ZD55FHIsPD1EGFP)以5型腺病毒为骨架,包含以CMV启动子启动表达的外源基因EGFP,以及在腺病毒纤毛蛋白的HIloop中间插入了人PD1与PDL1结合的8个保守氨基酸序列sPD1(7077aa).在免疫完全雌性BALB/c小鼠荷瘤4T1模型中,治疗组显出比对照溶瘤腺病毒ZD55EGFP治疗...
通过抑制SDF-1诱导的CXCR4-EGFP再分布,作者检测了纳米复合物对CXCR4的拮抗作用。发现与阳性对照组比较,FX以及FX@HP显示出类似的CXCR4拮抗作用,而PEI没有拮抗CXCR4的作用(图2A)。对于抗PD-L1治疗,在体外检测纳米复合物对LLC细胞的PD-L1沉...
pd-l1是40kda的1型跨膜蛋白,其在许多造血细胞上表达,包括树突细胞、巨噬细胞、间充质干细胞和骨髓源的肥大细胞。发现通过干扰素的作用在上皮细胞和内皮细胞上诱导表达pd-l1。发现免疫赦免的位点如胎盘和视网膜中的合胞体滋养层组成性地表达pd-l1。 胎盘中pd-l1的表达在妊娠第二期开始时增加,通过增加的氧上调,...
构建好的瞬时转染细胞株包括:293-PDL1-EGFP,293-PDL2-EGFP,293-B7H3-EGFP,293-B7H3-EGFP。 取构建好的细胞,重悬于0.5%PBS-BSA Buffer中,加入hu56V2-Fc抗体,同时设置阴性对照为2μg的针对其他不相关靶标的单域抗体,冰上孵育20min。洗涤后加入eBioscience二抗anti-hIg-PE,冰上20min。洗涤后将细胞重悬于500...
图3A和图3B示出hPD-L1血小板结合在人PD-1阳性T细胞上。结合在CD3/CD28Dynabeeds活化的PD-1阳性T细胞和未刺激的T细胞上的MEG-01衍生的EGFP-PD-L1血小板的代表性图像(3a)和定量(3b)(比例尺:10μm)。 图4示出在能生存的情况下分选CD8 图5A、图5B、图5C、图5D、图5E和图5F示出PD-L1血小板逆转糖尿病NOD小鼠...
在 来自MSCV启动子的U3启动子的下游和IRES-eGFP盒的上游编码抗PD-L1大抗体。 [0059] 图3A-3B提供了来自基于细胞的ELISA的数据,以确定38A1-scFV-Fc和19H9-scFV- Fc对PD-L1的亲和力。用19H9-scFV-Fc(图A)或38A1-scFV-Fc(图B)染色293-PD-L1。在293- PD-L1上将大抗体从100nM滴定至0.01nM、洗涤并用HRP...
The application of this MST method to PD-1-eGFP and PD-L1-eGFP expressed in CHO-K1 cells allowed us, for the first time, to determine the affinity of the complex formed between PD-1 and its ligand PD-L1 in tumour escape. The protocol has a variety of potential applications for ...