为了解剖T细胞淋巴瘤的发病机制,作者先前构建了一个基于他莫昔芬诱导的不可逆表达T细胞淋巴瘤致癌基因ITK-SYK的人类T-NHL的遗传可控小鼠模型,该模型在体内对成熟的CD4 T细胞进行强烈的致癌TCR信号传导,并携带一个增强型绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因(ITK-SYK小鼠;实验系统见图1a,b)。虽然在未受干扰的原始T细胞中急性...
随后表征发现,Pep LNP具有球形形状,EGFP mRNA的包封率为96.4%。在稳定性评估中,发现在 4°C 下保存14天后,EGFP/Pep LNP对CT26.CL25细胞转染效率开始略有下降,直到第35天显著下降,PDI值保持在0.1以下,说明粒径分布稳定(图2j-I),...
虽然白细胞介素(IL)-2诱导性T细胞激酶(ITK)-脾相关酪氨酸激酶(SYK)(与eGFP)在其他未受干扰的原代T细胞中急性表达可以引发淋巴细胞增殖数天,但它无法诱发明显的恶性肿瘤,这需要获得额外的遗传命中。然而,肿瘤抑制基因Pdcd1的丢失足以使淋巴瘤T细胞在...
PD-1/PD-L1通路被视为促进肿瘤逃逸的重要机制。PD-1属于B7家族成员之一,是一种免疫检查点,主要表达于活化的T细胞上,配体为PD-L1/PD-L2。与肿瘤细胞表面的配体(PD-L1/PD-L2)结合后,PD-1会下调 TCR/CD28 信号传导,促进负向通路,从而抑制T 细胞活化。帕博利珠单抗是首批表现出临床抗肿瘤功效且安全性良好的PD...
图1h示出pd-l1mk细胞经历成熟和分化的不同阶段(比例尺:10μm)。i:成熟egfp-pd-l1mk细胞;ii:前血小板从mk细胞的出芽;iii:前血小板从mk细胞的延伸;iv:前血小板从mk细胞的释放。图1i示出从l8057细胞延伸的pd-l1前血小板的形态(比例尺:10μm)。图1j示出纯化的pd-l1血小板的共聚焦图像(比例尺:2μm)。图...
1、细胞-外泌体孵化WB结果显示Exo-PD-1对应的PD-1表达量更多,表明Exo-PD-1比Exo-con更能被PD-L1过表达的肿瘤细胞吸收。说明PD-1与PD-L1结合可介导外泌体运输。 2、探究外泌体摄取途径:WB和共聚焦成像结果表明,相较于CDE(小窝蛋白介导内吞作用)抑制剂,Exo-PD-1-EGFP进入细胞能够被CME(网格蛋白介导内吞...
本发明提供一种PDL1靶向的重组溶瘤腺病毒及其应用.该病毒(ZD55FHIsPD1EGFP)以5型腺病毒为骨架,包含以CMV启动子启动表达的外源基因EGFP,以及在腺病毒纤毛蛋白的HIloop中间插入了人PD1与PDL1结合的8个保守氨基酸序列sPD1(7077aa).在免疫完全雌性BALB/c小鼠荷瘤4T1模型中,治疗组显出比对照溶瘤腺病毒ZD55EGFP治疗...
在 来自MSCV启动子的U3启动子的下游和IRES-eGFP盒的上游编码抗PD-L1大抗体。 [0059] 图3A-3B提供了来自基于细胞的ELISA的数据,以确定38A1-scFV-Fc和19H9-scFV- Fc对PD-L1的亲和力。用19H9-scFV-Fc(图A)或38A1-scFV-Fc(图B)染色293-PD-L1。在293- PD-L1上将大抗体从100nM滴定至0.01nM、洗涤并用HRP...
在来自mscv启动子的u3启动子的下游和ires-egfp盒的上游编码抗pd-l1大抗体。 图2提供了用于产生38a1-fc、19h9-fc和fmc63-fc的逆转录病毒质粒的示意图。在来自mscv启动子的u3启动子的下游和ires-egfp盒的上游编码抗pd-l1大抗体。 图3a-3b提供了来自基于细胞的elisa的数据,以确定38a1-scfv-fc和19h9-scfv-fc...
收集呈现EGFP-PD-L1的血小板并从培养基中纯化(图1j)。分离出的PD-L1呈现血小板在透射电镜(TEM)下呈球形形态(图1k)。动态光散射(DLS)分析表明,PD-L1血小板的平均直径为约1.5μm,ζ电位为约-10mV(图1l)。用凝血酶刺激后,在活化的血小板上检测到P-选择蛋白的表达。磷脂酰丝氨酸也呈现于活化的血小板表面上,表明...