[问答题,简答题] 简述扩增片段限制长度多态性(PCR-RFLP)三个步骤。相关知识点: 试题来源: 解析 1.先用PCR技术扩增含有序列差异的待测DNA片段。 2.根据靶片段序列特点,选用合适的限制序列特点,选用合适的限制酶切PCR产物。 3.运用凝胶电泳分离酶切割产物,根据片段的数量和片段长度判定等位基因和基因型。
[整理版]PCR-RFLP 【实验原理】聚合酶链式反应（PCR）是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应，可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链；人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合...
一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂糖凝胶电泳(检测基因型) 鸡DNA的获取 1、鸡翅下静脉采集全血;2%EDTA抗凝; 2、DNA提取: 裂解细胞核(红细胞+白细胞) ↓酚-氯仿去除蛋白质 一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产...
实验四PCR-RFLP基因分型实验内容CONTENTS01实验目的02实验原理03实验仪器与试剂04实验步骤05结果与分析0607实验结果处理思考题一、实验目的1.熟悉PCR-RFLP分析技术原理及实验步骤;2.掌握限制性核酸内切酶消化DNA的原理;3.了解PCR-RFLP分析技术在畜禽基因分型中的作用。限制性片段长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymoph...
rflppcr扩增牟隆复制条件片段 【实验原理】PCR-RFLP【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA...
5) 突变的分析；(6) 染色体步移；(7) RAPD、AFLP、RFLP等DNA多态性分析等。工具/原料 DNA模版 对应目的基因的特异引物 10×PCR Buffer 2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM Taq酶 操作步骤 1 在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix ...
1、DNA回收试剂盒2、50×TAE3、ddH2O 三、实验步骤 1）在紫外灯下切分含DNA的琼脂糖块，尽可能除去多余的琼脂糖．放入1.5ml离心管中。2）按每100mg琼脂糖加入300—600μl溶胶液的比例加入溶胶液（本实验加500ul），置55℃水浴10分钟，使琼脂糖块完全溶化，期间每2分钟颠例混匀一次促溶。3）将...
谢邀，我看楼上挺全面，就少荧光PCR 了。荧光PCR指的是用特殊的荧光染料染上核酸通过PCR定量。有几种...
因此,一经推出后便成为探针杂交领域最为经典的分子检测方法,广为运用于各种基因突变,如缺失、插入、易位等,及与限制性酶切片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)的鉴定中。Alwine等[2]于1977年推出基于转印杂交的Northern blot技术...
rflppcr扩增牟隆复制条件片段 【实验原理】PCR-RFLP【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA...