RFLP操作过程: (1)提取样本的Total DNA (2)酶切 (3)电泳---胶处理 (4)转膜 (5)杂交 (6)放射自显影 (7)结果分析SSCP基本过程: ①PCR扩增靶DNA; ②将特异的PCR扩增产物变性,而后快速复性,使之成为具有一定空间结构的单链DNA分子; ③将适量的单链DNA进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳; ④最后通过放射性自显...
[整理版]PCR-RFLP 【实验原理】聚合酶链式反应（PCR）是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应，可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链；人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合...
鸡基因组的PCR-RFLP分析 一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂糖凝胶电泳(检测基因型) 鸡DNA的获取 1、鸡翅下静脉采集全血;2%EDTA抗凝; 2、DNA提取: 裂解细胞核(红细胞+白细胞) ↓酚-氯仿去除蛋白质 一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR...
PCR-RFLP【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA掀遥腊瑶干卒炸斋你让贝胡哦损炳壕及...
【仪器与试剂】一、实验仪器1、琼脂糖凝胶电泳系统2、紫外观察分析仪3、离心机4、单面刀片5、恒温水浴锅 二、试剂 1、DNA回收试剂盒2、50×TAE3、ddH2O 三、实验步骤 1）在紫外灯下切分含DNA的琼脂糖块，尽可能除去多余的琼脂糖．放入1.5ml离心管中。2）按每100mg琼脂糖加入...
二、实验原理 第一代分子遗传标记RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶切位点碱基发生突变,或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失、重排等,导致酶切片段大小发生了变化,这种变化可以通过PCR,酶切及琼脂糖凝胶电泳进行检测,从而可比较不同品种(个体)的DNA水平的差异(即多态性),RFLP已被广泛用于基因组...
PCR-RFLP方法有以下优点:(1)PCR-RFLP方法远较PCR-SSO方法(指一般的PCR-SSO方法,而不是PCR-反相SSO方法)简单和实用,因为PCR-RFLP不需要制备和标记众多的SSO探针;(2)在鉴定单个碱基差异方面,PCR-RFLP方法可能比PCR-SSO方法更为简便和准确,因为PCR-RFLP方法无须繁琐地调整杂交和洗膜的条件;(3)PCR-RFLP显示二个...
谢邀，我看楼上挺全面，就少荧光PCR 了。荧光PCR指的是用特殊的荧光染料染上核酸通过PCR定量。有几种...
5) 突变的分析；(6) 染色体步移；(7) RAPD、AFLP、RFLP等DNA多态性分析等。工具/原料 DNA模版 对应目的基因的特异引物 10×PCR Buffer 2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM Taq酶 操作步骤 1 在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix ...
PCR-RFLP【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA掀遥腊瑶干卒炸斋你让贝胡哦损炳壕及...