of primers to return是指软件设计引物的数量默认为10对,如果引物少于10对时,有几对就会显示几对。引物的Tm值一行中,可以设定引物的最大Max、最小Min和最佳Tm值,以及正反向引物Tm的最大差值difference。对于qPCR来讲,最佳Tm值60℃,不需做任何修改。 大家都知道真核生物的基因组由内含子和外显子组成,而成熟的m...
将目的基因序列粘贴在页面左上的框框里; 在“Primer Parameters”条目下将“PCR product size”修改为Min=100,Max=300(荧光定量PCR法的有效扩增范围为70~350 bp,若要扩增更大的目的基因片段需增加延伸时间); 在该条目下找到“Primer melting temperatures(Tm)”设置所需引物的退火温度(一般设置为55℃~63℃) 在“...
Mfeprimer下载:https://github.com/quwubin/MFEprimer-3.0/releases 本人最近在筛选分子标记,然后发现合成了很多引物,但是多态性并不是很好,然后查阅了相关资料后发现一款软件mfeprimer能对我们的引物进行自由组合并得到预选的扩增条带,所以这里记录一下。当然这也叫电子pcr了哈。 安装教程官网也给出了:https://www.mfe...
-n##Maxmismatchesallowed(default0)-g##Maxindelsallowed(default0)-f##Use##discontiguoswords -o##Setoutputfile -t##Setoutputformat:1-classic,range(pos1..pos2)2-classic,midpoint 3-tabular 4-tabularwithalignmentincomments(slow)-d##-##Setdefaultstssize -p+-Turnhitspostprocesson/off -v+-...
PCR引物与探针 长度序列 GC含量探针复性温度引物复性温度 16-24bases(引物)不能有以下情况:任意2个引物或探针之间的序列互补引物或探针本身有二级结构连续的>GGG,引物的5’端有G引物3’端最后5个碱基有2个以上的G或C引物3’端最后1个碱基为A40-60%GCGC/AT分布大致均衡,C含量>G65-70°C60-65°C 2 第...
Min.: 0 °C(32 °F) Max.: 100 °C(212 °F) Weight 8 kg(17.64 lb) Width 300 mm(11.8 in) Depth 267 mm(10.5 in) Height 198 mm(7.8 in) Description PCR-Q16 Series Real Time PCR System is a portable fluorescence quantitative PCR instrument. This product adopts dual-channel and double...
PCR Product size最好是100-500bp之间,小于100bp的PCR产物琼脂糖凝胶电泳出来,条带很模糊,不好看。至于上限倒也不必要求苛刻。 Manual→Search parameters →人工搜索参数设置窗口。 Search stringency应选High。 GC含量一般是40-60%。 其它参数默认就可以。 Search progress 窗口中显示Search Completed→OK键 结果窗口...
Reaction volumes 5–125 µl (300 µl max) Can be centrifuged in a 96-place PCR-tube rack DNase-, RNase-, and human DNA-free Use the Selection Wizard for instrument compatibility bio-rad伯乐PCR8联管(高位)TBS0201 Product Options Number of Tubesin Strip Caps Color Package size(number of...
One unit of Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity incorporates 10 nmol of deoxyribonucleotide into acid-precipitable material in 30 min at 74°C. PCR Precautions An extension temperature of 68°C, the use of thin-walled reaction tubes for...
95℃ 5min 94℃ 1.5min 65 30s 30 ℃ × 72℃ 2min 72℃ 7min 在线PCR引物设计 第一步:找到Primer3 的站点。你不用记住这个站点,但是要记住 “Primer3”这 个词,然后打开GOOGLE 首页,输入Primer3,跳出来的第一个项目就是了 “ Primer3 Input 0.4.0 (primer3-web/htdocs/input-040.htm) ”网址是 ...