是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。 3. NF-kB信号通路抑制剂活性筛选 以NF-kB-Luc质粒构建报告基因细胞株,当NF-KB通路被激活后,启动报告基因转录。本体系中通常用TNFa作为刺激剂诱导NF-KB通路激活,测试化合物对该通路的抑制活性。
在肝炎中,TNFa是一种类似NF-kB活性的介质,特别是它对细胞膜形成的作用,在基因敲除的肝脏中,属于正调节(Fig.2a)。为了研究这一可能性,我们用具有中和作用的抗-TNFa抗体处理基因敲除的小鼠三天,然后进行分析肝细胞中NF-kB的活性。抗肿瘤坏死因子的治疗能消除肝细胞p65的核染色(图2b),进一步确定了NF - kB的活化主...
在肝炎中, TNFa是一种类似NF-kB活性的介质,特别是它对细胞膜形成的作用,在基因敲除的肝脏中,属于正调节(Fig. 2a。为了研究这一可能性,我们用具有中和作用的抗-TNFa抗体处理基因敲除的小鼠三天,然后进行分析肝细胞中NF-kB的活性。抗肿瘤坏死因子的治疗能消除肝细胞p65的核染色(图2b ,进 一步确定了NF - kB的...
且这些基因主要富集在NF-κB信号通路中,LPS处理使NOD1、RIPK2、NFKBIA、NFKBIB和TNFAIP3 mRNA中的m6A修饰显著变化。此外,METTL3敲除或FTO过表达都使NOD1/NF-κB通路中的基因水平发生变化,表明该通路的激活受m6A RNA甲基化调控,且m6A RNA甲基化水平变化可能与活性氧(ROS)、HIF-1α和MAT2A增加有关。总之,LPS通过...
2a。为了研究这一可能性,我们 用具有中和作用的抗 -TNFa 抗体处理基因敲除的小鼠三天,然后进行分析肝细胞 中 NF-kB 的活性。 抗肿瘤坏死因子的治疗能消除肝细胞 p65的核染色 (图 2b , 进一步确定了 NF - kB的活化主要由 TNFa 诱导的预测。 要确定肝炎中肿瘤坏死因子的来源,我们把肝细胞分为野生型和基因敲除...
NF-KB是参与免疫调节,炎症反应,肿瘤发生等过程重要的转录因子,在TNFa,IL-1β,LPS等因子诱导下NF-KB发生核转位并渺活其转录活性.尝试利用高内涵筛选(High Content Screerung,HCS)和RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术建立NF-KB核转位高通量筛选体系,该体系的应用将有助于发现新的NF-KB信号通路调节因子,为免疫与...
在肝炎中,TNFa是一种类似NF-kB活性的介质,特别是它对细胞膜形成的作用,在基因敲除的肝脏中,属于正调节(Fig.2a)。为了研究这一可能性,我们用具有中和作用的抗-TNFa抗体处理基因敲除的小鼠三天,然后进行分析肝细胞中NF-kB的活性。抗肿瘤坏死因子的治疗能消除肝细胞p65的核染色(图2b),进一步确定了NF - kB的活化主...
通过原代细胞以及细胞系的过表达和干涉抑制实验，我们发现MAML1可通过促进TNFa激活的IKKb磷酸化水平、加速IkBa降解及p65入核等上调NF-kB信号通路，进而激活其靶基因的表达。重要的是，在炎性相关肿瘤中MAML1的表达水平显著增加。因此，该工作表明MAML1在NF-kB介导的肿瘤炎性调控中发挥了重要作用，并且可能作为临床抑制...
8、 CXCL、CCL3、CXCL2、CCL5)、基质金属蛋白酶(MMPs,如MMP9)、促增殖蛋白(如细胞周期素D1和MYC)、抗凋亡蛋白(如BCL-X、BCL-2、FLIP)、促炎症性酶(如COX2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS )、血管生成因子(VEGF)、黏附分子(VCAM1)、细胞间黏附分子(ICAM1、E选择素)...