（Ji-hang Yuan, 2014, Cancer Cell）实验流程MS2-RIP技术主要流程包括：MS2蛋白表达载体构建、MS2 BS-lncRNA载体构建、共转化细胞、免疫沉淀、结果分析。MS2蛋白表达载体构建：在MS2两端添加Flag标签和GFP，Flag标签氨基酸序列较短，一般不会干扰MS2的天然构象，可作为纯化标签，GFP可用于观察融合蛋白Flag-MS2-EGFP的...
技术介绍：MS2-RIP技术可用于体内检测lncRNA与miRNA的互作。MS2结合位点（MS2 Binding Site，MS2 BS）是一段由19个碱基组成的RNA茎环结构序列，是MS2蛋白的结合位点。构建串联表达MS2 BS-lncRNA表达载体和MS2蛋白表达载体，共转入实验细胞中，MS2蛋白会结合至lncRNA末端的MS2 BS上，然后通过免疫沉淀分离MS2蛋白，与ln...
(Ji-hang Yuan, 2014, Cancer Cell) 实验流程 MS2-RIP技术主要流程包括:MS2蛋白表达载体构建、MS2 BS-lncRNA载体构建、共转化细胞、免疫沉淀、结果分析。 MS2蛋白表达载体构建:在MS2两端添加Flag标签和GFP,Flag标签氨基酸序列较短,一般不会干扰MS2的天然构象,可作为纯化标签,GFP可用于观察融合蛋白Flag-MS2-EGFP的表...
实验流程 MS2-RIP技术主要流程包括:MS2蛋白表达载体构建、MS2 BS-lncRNA载体构建、共转化细胞、免疫沉淀、结果分析。 MS2蛋白表达载体构建:在MS2两端添加Flag标签和GFP,Flag标签氨基酸序列较短,一般不会干扰MS2的天然构象,可作为纯化标签,GFP可用于观察融合蛋白Flag-MS2-EGFP的表达效率。 MS2 BS-lncRNA载体构建:将MS2...
摘要:【目的】为了探讨lncRNA DANCR在肿瘤细胞中的作用机制,本研究拟构建一种新的MS2-RIP方法用于鉴定DANCR的相互作用分子。【方法】利用MS2噬菌体衣壳蛋白可与噬菌体复制酶编码基因5’端一段由19个碱基组成的RNA茎环结构序列,即MS2结...
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实验流程 MS2-RIP技术主要流程包括:MS2蛋白表达载体构建、MS2 BS-lncRNA载体构建、共转化细胞、免疫沉淀、结果分析。 MS2蛋白表达载体构建:在MS2两端添加Flag标签和GFP,Flag标签氨基酸序列较短,一般不会干扰MS2的天然构象,可作为纯化标签,GFP可用于观察融合蛋白Flag-MS2-EGFP的表达效率。