这种脂质-mRNA加合物无法采用毛细管电泳（CE）鉴定，但是，在IP-RP HPLC色谱图上表现为独特的晚洗脱峰(LP)，与mRNA主峰形成鲜明对比。这项研究找到了之前被忽略的一项非常重要的质量监控参数：脂质-mRNA加合物含量。必须通过原材料控制、制造工艺参数、配方设计和 LNP 储存条件来减轻脂质-mRNA加合物反应的发生。同时...
他们通过反相离子对高效液相色谱(IP-RP HPLC)鉴定出脂质与mRNA发生加合反应生成的一类杂质,这种杂质通过常规mRNA分析手段无法检测到,由源自可电离阳离子脂质的降解成分添加到碱基或者核糖上引起。
他们通过反相离子对高效液相色谱(IP-RP HPLC)鉴定出脂质与mRNA发生加合反应生成的一类杂质,这种杂质通过常规mRNA分析手段无法检测到,由源自可电离阳离子脂质的降解成分添加到碱基或者核糖上引起。
抗体通常为全长的免疫球蛋白，大多数为IgG类型。目前大多数治疗性抗体是需要二硫键的异源四聚体，糖基化会影响其功能，因此大多数在哺乳动物细胞中生产。为了降低生产成本，实现在大肠杆菌等传统宿主中制备，研究人员通过基因工程或酶切技术从全长抗体中分离出功能性结构域，即抗体片段。抗体片段在双特异性抗体和CAR-...
这种脂质-mRNA加合物无法采用毛细管电泳(CE)鉴定,但是,在IP-RP HPLC色谱图上表现为独特的晚洗脱峰(LP),与mRNA主峰形成鲜明对比。这项研究找到了之前被忽略的一项非常重要的质量监控参数:脂质-mRNA加合物含量。 必须通过原材料控制、制造工艺参数、配方设计和 LNP 储存条件来减轻脂质-mRNA加合物反应的发生。同时,也...
这种脂质-mRNA加合物无法采用毛细管电泳(CE)鉴定,但是,在IP-RP HPLC色谱图上表现为独特的晚洗脱峰(LP),与mRNA主峰形成鲜明对比。这项研究找到了之前被忽略的一项非常重要的质量监控参数:脂质-mRNA加合物含量。 必须通过原材料控制、制造工艺参数、配方设计和 LNP 储存条件来减轻脂质-mRNA加合物反应的发生。同时,也...
严格的纯化工业可以减少免疫原性杂质。mRNA在体外转录(IVT)过程中会产生双链RNA(dsRNA)杂质。为避免诱导产生先天免疫反应,需要在纯化过程中去除,常用的方法有反相高效液相色谱(RP HPLC)或纤维素纯化法。 义翘神州mRNA免疫制备抗体技术 义翘神州提供一站式mR...
IP-RP-HPLC法定量测定mRNA 5’帽 RP-HPLC法测定聚(A)尾RNA的百分比 凝胶电泳检测mRNA的完整性 纯度免疫印迹法检测dsRNA 残余DNA模板(qPCR) 如欲了解上述方法详细步骤可在评论留邮箱,将通过邮箱发送USP指南草案。 笔者点评:mRNA疫苗或治疗产品研发投产过程中的一大难点就是各个关键步骤质控的分析和测试。2020年8月,...
环化效率是circRNA疫苗的CQA,常使用毛细管电泳(CE)测定,但因mRNA环化前体与circRNA分子量相似,CE结果准确性不高。参考ICH Q2/Q14指南,可结合CE和RP-HPLC进行测定。 RNA经I/II类内含子自剪接环化时,高环化度会导致circRNA产量提高并利于疫苗质量控制。研...
目前较为成熟的策略是在IVT反应后添加DNase去除DNA，再进行后续常规的纯化手段如疏水相互作用色谱法(HIC)以有效分离mRNA 与蛋白质、dsRNA 和短 RNA，反相高效液相色谱法(RP-HPLC)以降低dsRNA诱导的免疫反应。mRNA包封即将mRNA 封装进载体中。这边以LNP举例。LNP具备自组装能力，即脂质成分发生分子间相互作用而自发组织...