eGFP mRNA-LNP,脂质纳米颗粒 英文名称:eGFP mRNA-LNP 规格:mg/g 组成成分 eGFP mRNA:eGFP 是一种常用的报告基因,其 mRNA 编码了能够发出绿色荧光的蛋白质。mRNA 携带了合成 eGFP 的遗传信息,进入细胞后,可在细胞内的核糖体上被翻译成 eGFP 蛋白。脂质纳米颗粒(LNP):通常由多种脂质成分组成,包括阳离子...
在PYRO注射裸mRNA后,即便引流淋巴结中没有mRNA的迁移,但是也存在EGFP阳性的APC细胞,说明在皮肤中的APC吸收抗原mRNA后迁移到引流淋巴结中,从而与淋巴结中的T细胞发生相互作用,完成抗原呈递过程,最终触发高效的体液免疫和细胞免疫反应。更加重要的是,在小鼠攻毒模型中,PYRO注射裸Spike mRNA免疫小鼠可显著降低体内病...
下文中菌菌将聚焦于mRNA技术领域,结合实际案例分享报告基因eGFP mRNA的应用范围,如细胞转染对照、mRNA序列优化、目标基因的表达示踪。一、报告基因eGFP简述 绿色荧光蛋白(GFP)来源于水母Aequorea victoria,能够在原核和真核生物体内表达荧光蛋白。然而GFP发光信号较弱,因此科学家对其进行了改造,并筛选得到增强型绿色荧...
2.2 eGFP mRNA用于mRNA优化 为提高mRNA的稳定性和翻译效率,可以针对mRNA序列元件与修饰进行优化,例如5′ Cap、UTRs、PolyA尾巴、修饰核苷酸等。在mRNA序列元件的优化过程中,报告基因mRNA是一种便捷且有效的工具。 耀海团队在UTR序列和核苷酸修饰方面积累了丰富的经验,我们先后尝试了天然与突变UTR序列、不同修饰核苷酸对...
此外,还测试了递送 EGFP mRNA 的其他基于 CLP 的 LNP 在体外的转染效果,共聚焦图像显示这些 LNP 能将 EGFP mRNA 成功转染到 A549 细胞中,并表达出 EGFP 蛋白(图2D)。 流式结果表明,Q1L/IL 相对于其他 LNP,细胞内荧光强度稍高, EGFP 阳...
体外研究表明,在B16F10、HEK293T、DC2.4以及原代抗原呈递细胞如BMDC中,与非氟化LNP制剂(DSPE-PEG-LNP)相比,FPD的引入可以提高eGFP mRNA在这些细胞系中的表达水平。 图2eGFP mRNA-F-LNP 的不同细胞递送能力 接下来,研究团队用不同的细胞内化抑制剂处理细胞,...
EGFP IVT mRNA(998 nt),浓度为1129 ng/μL; 3.2色谱条件 色谱柱:Biozen dSEC-7(4.6×300 mm, 3 μm, 700 Å);P/N: 00H-4789-E0 流动相:如下所示 流速:0.3 mL/min 柱温:30 ℃; 波长:260 nm; 上样量:1 μL 梯度方法:等度 3.3结果与讨论 ...
CLSV 系统在体外展现出高效的转染能力(图2A-C),能同时将 EGFP 和 mCherry mRNA 转染到 CT26 和 293T 细胞中,转染效率分别为 71.58% 和62.18%(CT26细胞)以及87.67%和78.16%(293T细胞)。 通过使用不同的内吞作用抑制剂,研究者发现,微胞饮和脂筏介导的内吞作用在 CT26 细胞摄取 CLSV/mRNA 复合物中起着更...
报告基因类mRNA常用于细胞转染、翻译效率、药物递送、体内成像等研究。其中爱必信EGFP mRNA是一种最常用的示踪蛋白mRNA,荧光稳定性强,用于表达加强的绿色荧光蛋白(分离自水母),发射波长为509nm,可通过荧光显微镜或者流式细胞术检测,是观察mRNA递送、翻译的理想工具。图 EGFP mRNA Agarose电泳条带 图 HEK293细胞...
eGFP mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)编码一种绿色荧光蛋白,其最大激发/发射光波长分别为488nm /509nm,转染到细胞中可表达出增强的绿色荧光,可作为对照研究靶基因在哺乳动物细胞中的转染和表达。本产品通过引入N1-Me-Pseudo UTP替换天然UTP,有效降低mRNA在哺乳动物细胞中的自身免疫原性,增强mRNA的稳定性。同时还模拟具有...