做miRNA封闭呢，也可以用质粒或者病毒载体做。目前常用的有miRNA sponge技术和miRNA antago技术。miRNA sponge是利用miRNA-mRNA的相互作用，设计出带有串联排列的miRNA结合位点的质粒载体，作为分子海绵吸附相应miRNA，解除对其靶基因的抑制。miRNA antago技术也是利用miRNA-mRNA的相互作用，但只设计含有一个miRNA结合位点的质...
第二,逐个进行合成进行混合,成本更高,而且转染更加困难,具有饱和效应和竞争效应; 第三,很多细胞和组织对于核酸物质有抗性,转染困难,而sponge可以装到病毒载体中,十分有利于进行对于原代和比较难转染细胞和动物的侵染;虽然miRNA antagomir可以弥补一些组织吸收方面的劣势,...
敲除单一 miRNA 位点往往不能达到预想的基因调节效果。 为此,麻省理工大学研究人员开发了 miRNA sponge 技术,用于长效抑制多种具有相同功能的 miRNA。 该技术将串联重复(6x或8x)miRNA 结合域克隆至由 CMV 启动子调控的载体上转染宿主后,miRNA sponge 以 mRNA 的形式转录至胞质中,诱导胞质中具有相似结合域的 miRNA ...
2007年,麻省理工大学的Phillip Sharp及他的同事利用相似的原理,开发出一种长期抑制miRNA基因的高效方法1。他们称之为miRNA海绵(miRNA sponge),意思是吸满了miRNA,这样它就无法与天然靶点结合。miRNA海绵是一条mRNA,其3’ 非翻译区(UTR)包含若干个miRNA靶定位点。更重要的是,这些靶定位点在RISC切割位点有一些错配。...
miRNA海绵(miRNA sponge)是2007年由麻省理工大学的Phillip Sharp及他的同事利用开发出一种长期抑制miRNA基因的高效方法。miRNA海绵是一条mRNA,其3’ 非翻译区(UTR)包含若干个miRNA靶定位点。主要是利用这些靶定位点在RISC切割位点有一些错配。这样,抑制剂mRNA就不会被降解,而与RISC稳定结合,让它远离天然的mRNA靶点。
研究miRNA干扰通常有三种方法：（1）antango，合成mature-miRNA序列的反向互补序列构建到载体上；（2）sponge，一般是将4个mature-miRNA序列的反向互补序列用linker连接，合成相应序列，构建到载体上；（3）inhibitor，直接化学合成mature-miRNA反向互补序列。sponge有多条mature-miRNA反向互补序列，相比单条序列，干扰效率更...
miRNA sponge抑制载体设计与构建中,经特异地优化设计,增强吸附能力的同时增加了更多的结合位点,这样提高了成熟miRNA或siRNA抑制能力,消弱细胞中miRNA或siRNA导致的基因沉默效应,从而进行miRNA或siRNA功能缺失性研究。miRNAsponge抑制载体设计与构建举例如下:一种多靶向miRNA海绵体序列质粒载体的构建方法,包括: ...
miRNA sponge是利用miRNA-mRNA的相互作用,设计出带有串联排列的miRNA结合位点的质粒载体,作为分子海绵吸附相应miRNA,解除对其靶基因的抑制。miRNA antago技术也是利用miRNA-mRNA的相互作用,但只设计含有一个miRNA结合位点的质粒载体。跟sponge比较,antago封闭miRNA的功能比较弱,正常情况下优先选择miRNA sponge。
miRNA sponge是利用miRNA-mRNA的相互作用,设计出带有串联排列的miRNA结合位点的质粒载体,作为分子海绵吸附相应miRNA,解除对其靶基因的抑制。miRNA antago技术也是利用miRNA-mRNA的相互作用,但只设计含有一个miRNA结合位点的质粒载体。跟sponge比较,antago封闭miRNA的功能比较弱,正常情况下优先选择miRNA sponge。
miRNA sponge是利用miRNA-mRNA的相互作用,设计出带有串联排列的miRNA结合位点的质粒载体,作为分子海绵吸附相应miRNA,解除对其靶基因的抑制。miRNA antago技术也是利用miRNA-mRNA的相互作用,但只设计含有一个miRNA结合位点的质粒载体。跟sponge比较,antago封闭miRNA的功能比较弱,正常情况下优先选择miRNA sponge。