miRNA在细胞发育、增殖、分化和凋亡等生物过程中发挥重要作用,并与多种疾病(如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病)的发生和发展密切相关。miRNA的研究不仅有助于解析基因调控网络,还具有巨大的临床应用前景。 诺禾致源在miRNA测序领域已深耕数十载,积累了丰富的物种和组织项目经验。迄今为止,诺禾致源已助力科研工作者...
在植物中,miRNA主要通过剪切mRNA和抑制翻译两种方式对靶基因进行负调控,在基因表达调控、发育过程以及应对环境胁迫中发挥着重要作用。深入了解miRNA的功能和机制,不仅为植物生物学研究提供了全新的视角,也为开发新的农业应用带来重要机遇。 诺禾致源在miRNA/smallRNA测序领域已深耕数十载,积累了丰富的物种和组织项目经验。
确定研究表型的miRNA:一般来源于测序或者文献调研,建议从miRNA的测序开始研究。 miRNA的定量:RT-qPCR(Loop反转录法、poly(A)加尾法)。 确定miRNA在某种感兴趣的表型中靶基因:生信分析结合文献,预测靶基因一般涉及到Targetscan、miRDB、PicTar等软件预测靶基因3‘UTR与miRNA的结合位点。预测的靶基因成千上万,通过查阅文...
miRNA-seq是为了检测miRNA的表达情况发展起来的高通量测序方法。由于miRNA的序列很短,因此建库时可以直接添加接头,进行逆转录扩增,通过PCR扩增并添加测序接头,然后纯化特定范围的DNA片段,进行上机测序,结合数据分析可以了解miRNA的表达情况(图4)。图4 miRNA测序实验流程图。文献案例 2023年6月,Wang等人在Frontiers ...
暗示该miRNA可作为治疗抑郁症的潜在靶点。 MicroRNA-26a-3p挽救雄性大鼠抑郁样行为的模型示意图 主要研究结果 ▪ 鉴定CUMS诱导的抑郁症大鼠模型中差异表达的miRNA谱 miRNA表达谱随不同细胞类型和条件而有显著差异。因此,研究人员首先使用miRNA-seq技术研究了正常对照和CUMS诱导的抑郁大鼠海马DG中的miRNA表达谱。结果...
图1. NIPSS技术用于miRNA直接测序方法原理及信号展示 在该工作中,DNA-miRNA嵌合链被用做纳米孔测序的模板链(图2)。嵌合链可以通过使用T4 RNA连接酶连接待测miRNA 3端和DNA 5端来构建。在NIPSS测序过程中,DNA聚合酶合成DNA时,产生驱动力拉动嵌合链整体向cis侧移动,由于“位差”的存在,其连接的miRNA碱基逐个通过...
miRNA-seq是为了检测miRNA的表达情况发展起来的高通量测序方法。由于miRNA的序列很短,因此建库时可以直接添加接头,进行逆转录扩增,通过PCR扩增并添加测序接头,然后纯化特定范围的DNA片段,进行上机测序,结合数据分析可以了解miRNA的表达情况(图4)。 图4 miRNA测序实验流程图。
1、miRNA测序技术特点: (1)高灵敏度:理论上可以检测单个细胞中一个拷贝的miRNA; (2)高精度:可以检测miRNA单个碱基的差异; (3)不受先验信息的干扰,既能鉴定已知miRNA,又有能力发 (4)不受先验信息的干扰,既能鉴定已知miRNA,又有能力发现新的miRNA;
目前,有多种方法可以用来检测miRNA,其中包括实验室技术和计算机模拟方法。实验室技术主要有定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)、北方印迹、原位杂交和测序等。这些方法都有各自的优势和限制,可以根据研究的目的和需求选择合适的方法。 qRT-PCR是一种常用的miRNA检测方法。这种方法通过逆转录将miRNA转化为cDNA,然后使用特异...
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