首先,目前普遍采用的mRNA-LNP处方多是通过由阳离子磷脂、DSPC(二硬脂酰磷脂酰胆碱)、胆固醇、DMPE-PEG2000(磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000)构建的LNP来实现对mRNA分子的包载。几种磷脂分子发挥各自的功效将mRNA分子包裹在内部形成一个球形的脂质纳米粒,而且通过处方的调整,也可以实现粒径大小不同的LNP制备,详见图1电镜...
图1. 不同含量PEG磷脂下mRNA-LNP的粒径大小 (实心圆为mRNA-LNP,空心体为空载的LNP) 随后分别在脂肪细胞和肝细胞上研究不同粒径大小的mRNA-LNP的体外转染效率,详见图2中数据结果所示。首先在mRNA-LNP的摄取上,肝细胞对mRNA-LNP的摄取并未展现出粒径依赖性,而在脂肪细胞上,64 nm的LNP呈现出了较突出的细胞摄取。
mRNA疫苗所包封的mRNA会影响终LNP的结构:siRNA 在结构和分子量大小上与 mRNA 有很大不同(表 2)并且N/P(可电离的阳离子脂质与核苷酸磷酸盐)摩尔比不同,N/P摩尔比分别为3和6(表 1)。mRNA 至少比 siRNA 大 100 倍,这会影响 LNP 的结构。此外,有迹象表明 mRNA 位于 LNP 的核,而siRNA 更靠近表面,mRNA 可以...
Peter Cullis团队在针对LNP组分配比的优化过程中发现,高水平辅助脂质配比的LNP-mRNA系统可形成新的独特结构。该结构与上一文章中通过改变可电离阳离子脂质与缓冲液参数形成的囊泡(Bleb)结构有所不同,随着辅助脂质含量增加,LNP-mRNA系统的形态会逐渐从单独的固形核心结构发展为一个围绕更小固形核心的水室双层结构:“...
mRNA疫苗中的LNP 由四种主要成分组成(见表1):中性磷脂、胆固醇、聚乙二醇 (PEG) 脂质和可电离脂质。可电离脂质含有带正电荷的可电离胺基团(在低 pH 条件下电离),可在颗粒形成过程中与阴离子mRNA 相互作用,并在细胞摄取过程中促进膜融合。此外,PEG化脂质用于控制粒径并充当空间屏障起稳定作用,防止储存过程LNP微粒...
LNP结构示意图 LNP(脂质纳米颗粒)是mRNA重要的递送系统。LNP通常由阳离子脂质、共轭脂质、非阳离子脂质(胆固醇及中性脂质混合体)及其他赋形剂构成。 两种mRNA COVID19疫苗LNP成分对比 阳离子脂质体:在生产原液时,将mRNA和阳离子脂质体在特定pH值下混合在一起,则阴离...
这也可以与 mRNA 的二级和三级结构的表征和优化相结合,因为有迹象表明一些折叠结构更为稳定。 本报告是对 mRNA-LNP 疫苗不稳定性背后的因素的文献综述,还指出了规避这些不稳定性因素的解决方案,从而开发出能耐受更高储存温度的mRNA-LNP疫苗,从而解决当前疫苗流通过程所需储存条件苛刻的问题。
除了mRNA 的完整性外,LNP 的稳定性对于 mRNA-LNP 疫苗的质量也至关重要。目前的mRNA疫苗没有披露关于LNP 稳定性测试的数据,但 Onpattro (patisaran) 的siRNA-LNP 制剂保存在2~8°C 之间时具有三年的有效期,同时该产品不能冷冻保存。 Onpattro 的LNP 系统的组成是:可电离的阳离子脂质DLin-MC3-DMA、DSPC、...
作者: 这个LNP结构图很直观,LNP就是mRNA疫苗中的纳米颗粒,负责把mRNA送进细胞里。
1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)是一种临床用于siRNA疗法Onpattro和SARS-CoV-2 mRNA疫苗的LNP中的结构脂质。DSPC的结构由磷脂酰胆碱头部基团和两个饱和的18碳尾部组成,两个尾巴形成紧密堆积的脂质双层。在LNP中,DSPC主要位于纳米粒子表面和在纳米粒核心中的较为边缘位置。1,2二油酰基-sn-甘油-3-磷...