自噬发生时，LC3 蛋白合成后立即在其羧基端被 Atg4 所剪切，产生细胞浆定位的 LC3-I。在自噬过程中，LC3-I 会被包括 Atg7 和 Atg3 在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为 14kD 的 LC3-II，并定位到自噬小体中。LC3-II 的含量和发生自噬的程度成正比，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。得益...
LC3-II是自噬体的重要标志分子, 随自噬体膜的增多而增加。 Atg5-Atg12 complex conjugation system and LC3-PE conjugation system. (Jong-Ok Pyo, et al. 2012) 基于LC3的自噬流检测方法 超微电镜是观察自噬现象的最直接的方法。不过,超微电镜只能提供静态信息,不能检测自噬流,也不能区分自噬体的积累是由于...
LC3是自噬标志物，自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。pro-LC3；立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽，暴露甘氨酸，这个是LC3-I，胞浆分布。自噬过程中，LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下（...
图7. LC3自噬双标系统追踪自噬流不同阶段(Hansen T E, Johansen T. BMC Biology, 2011) 3、Western Blot检测LC3和p62蛋白的表达量 ① 利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化评价自噬形成(图8)。自噬形成时,胞浆型LC3-I会酶解掉一小段多肽,随后跟PE结合转变为膜型的LC3-II。因此可以通过LC3-II/I比值的...
当LC3-I和LC3-II总量恒定时,LC3-II/LC3-I用来表示自噬的水平。其次,与LC3-II相比,LC3-I对反复冻融更加敏感,更容易降解,因此一般需要用新鲜制备样品上样。这点倒是有可能,之前制好的样本经过几次优化和反复冻融,有可能造成LC3-I检测不到。 师兄说:选择合适的一抗也很重要...
LC3是自噬形成标志物。 P62与经泛素化的蛋白结合,再与LC3-II蛋白结合形成复合物,并最终在溶酶体内降解,在自噬过程中P62会不断被消耗。 这三个蛋白是检测自噬的关键蛋白。 Frontiers in immunology 9 (2018): 1881. 应用Immunoway LC3B (YM3381) 其他检测方...
线粒体自噬时,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体,此时LC3-I蛋白被修饰形成LC3-II蛋白,LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤的线粒体降解。研究人员选取周龄一致的大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和大强度运动组。训练一段时间后,测量大鼠腓肠肌细胞LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相对含量,结果如下图。下列...
1细胞自噬是在一定条件下“吃掉”自身的结构和物质的过程,内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体时,LC3-I蛋白被修饰形成LC3-II蛋白,LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合,完成损伤线粒体的降解。将大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和高强度运动组,测量细胞中LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相对含量,结果如图所示。下列叙述...