7、洗涤：孵育结束后，弃去上清，用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤2-3次后，加入2mL PBS或培养基（可含血清）。8、观察拍照：荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。激发波长通常为488nm，发射波长为红色荧光590nm，绿色荧光530nm。细胞凋亡水平降低时，线粒体膜电位升高，即红色荧光较强；当细胞凋亡水平升高时，线粒体...
线粒体膜电位检测(JC-1)实验教程。#线粒体膜电位检测 #细胞凋亡 #实验室 #科研狗的日常 #信天翁GOONIE - RNA提取小能手于20240916发布在抖音,已经收获了39个喜欢,来抖音,记录美好生活!
6. 用2 mL细胞培养液或者缓冲液重悬细胞,之后室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清; 7. 重复步骤6); 8. 用0.5 mL新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞,即可进行后续的流式分析。注意:请马上进行流式定量分析,此细节很重要。 数据分析:含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测;含有绿色JC-1单体的凋亡或...
成像方案包括不同细胞类型的JC-1染色条件,例如粘附细胞和游离细胞。 获取用于成像的JC-1染色方案 JC-1染料的替代品 虽然JC-1染料被广泛使用,但在流式细胞术中有适合不同滤光片的替代试剂,有使用单发射、非比率...
JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanineiodide)是一种阳离子脂质荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。 JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色...
JC-1法检测线粒体膜电位,以及检测线粒体膜电位的操作步骤! 4、对于贴壁细胞: 注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,应先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 吸除6 孔板培养液,根据具体实验如有必要可以用 PBS 或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入 1ml 细胞培养液。细胞培养液中可以...
染色步骤如下：首先收集细胞悬液，并调整至1ml。然后制备阳性对照，以去极化药物处理过的细胞作为参照。接下来，融化1管JC-1储存液，每1ml细胞悬液中加入2.5L（终浓度：2.5ug/ml），并振荡直至标本形成均一的红紫色。JC-1在水相中容易形成聚集体，因此需要边振荡边加染料。未用完的染料不应再保存...
在活细胞中，JC-1在去极化膜电位下以绿色荧光单体形式存在，或在超极化膜电位下以橙色荧光J聚集体形式存在。然后用50nM FCCP（一种原生细胞）处理细胞，使线粒体膜去极化。加入解耦器后约10分钟，将电池照亮488nm，并在515-545nm和575-625nm之间收集发射。JC-10（货号：HCQ000588FY）JC-10 是 JC-1 的优越...
实验步骤如下：首先，将细胞接种于96孔板或内置盖玻片的24孔板中，每孔接种数量分别为1.5万或9万。在接种24小时后，用含糖的Earle’s液清洗两遍，然后进行相应的处理，如氧化应激或药物处理。接下来，用含糖Earle’s液清洗细胞一次，更换终浓度为10 µg/ml的JC-1探针，在培养箱中孵育20分钟...
通过测定JC-1的荧光强度比值,可以反映线粒体膜电位的高低。 具体实验步骤如下: 1.将细胞或组织块离心,去除上清液,用PBS洗涤一遍,离心。 2.将细胞或组织块加入含有1μM的JC-1的PBS缓冲液中,室温下孵育30分钟。 3.离心洗涤一遍,去除上清液。 4.将细胞或组织块加入含有PBS缓冲液的离心管中,用流式细胞仪或荧光...