7、洗涤：孵育结束后，弃去上清，用JC-1染色缓冲液(1×)洗涤2-3次后，加入2mL PBS或培养基（可含血清）。8、观察拍照：荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。激发波长通常为488nm，发射波长为红色荧光590nm，绿色荧光530nm。细胞凋亡水平降低时，线粒体膜电位升高，即红色荧光较强；当细胞凋亡水平升高时，线粒体...
成像方案包括不同细胞类型的JC-1染色条件,例如粘附细胞和游离细胞。 获取用于成像的JC-1染色方案 JC-1染料的替代品 虽然JC-1染料被广泛使用,但在流式细胞术中有适合不同滤光片的替代试剂,有使用单发射、非比率...
线粒体膜电位检测(JC-1)实验教程。#线粒体膜电位检测 #细胞凋亡 #实验室 #科研狗的日常 #信天翁GOONIE - RNA提取小能手于20240916发布在抖音,已经收获了39个喜欢,来抖音,记录美好生活!
JC-1有单体和多聚体两种存在状态,在低浓度时以单体的形式存在,高浓度时以多聚体形式存在,两者的发射光谱不同,但均可在流式细胞仪绿色(FL-1)通道检测出绿色荧光,JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内,正常健康线粒体的膜电位(△)具有极性,JC-1依赖于△的极性被迅速摄入线粒体内,并因浓度增高而在线粒体...
JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法): 1. 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
JC-1法检测线粒体膜电位,以及检测线粒体膜电位的操作步骤! 4、对于贴壁细胞: 注意:对于贴壁细胞,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,应先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。 吸除6 孔板培养液,根据具体实验如有必要可以用 PBS 或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入 1ml 细胞培养液。细胞培养液中可以...
通过测定JC-1的荧光强度比值,可以反映线粒体膜电位的高低。 具体实验步骤如下: 1.将细胞或组织块离心,去除上清液,用PBS洗涤一遍,离心。 2.将细胞或组织块加入含有1μM的JC-1的PBS缓冲液中,室温下孵育30分钟。 3.离心洗涤一遍,去除上清液。 4.将细胞或组织块加入含有PBS缓冲液的离心管中,用流式细胞仪或荧光...
凋亡细胞则大多为FL1单阳性。不同荧光颜色的转变反应线粒体膜电位的变化,常用红绿荧光的相对比例衡量线粒体去极化的比例。 二、实验步骤 (1) 收集细胞:细胞悬液转入离心管中,1000rpm离心5min收集细胞,弃上清。 (2) PBS洗涤细胞:加入3ml 4℃预冷的PBS完全重悬细胞,1000rpm离心5min,弃上清。沉淀震荡混匀。
因此,通过检测JC1荧光信号的变化可以间接反映出线粒体膜电位的变化情况。 4. 实验步骤 4.1 细胞样品的制备 •从培养皿中取出待测细胞样品。 •使用PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤细胞,去除培养基中的残留物。 •将细胞悬浮于适量的PBS中,使其成为单细胞悬液。 4.2 JC1染色 •取适量的细胞悬液,转移至离心管中...