IP-MS的实验流程如下图所示，包括：（1）材料获取：细胞或组织。（2）蛋白提取：可根据目的蛋白的特性加入不同类型的IP裂解液及抑制剂。如：非磷酸化蛋白可不添加磷酸酶抑制剂；IP背景高，选用裂解度高的裂解液；目的蛋白IP不下来，选用裂解度低的裂解液等。（3）Beads结合抗体孵育：对应的抗体与Beads结合，注意...
基本流程 1. 裂解样品,准备蛋白样品; 2. 准备抗体-Protein A/G beads; 3. 样品,抗体-Protein A/G bends共孵育; 4. 洗脱; 5. WB检测。 报告内容 WB结果和实验报告。 发布于 2021-12-08 09:58 wb实验 免疫 免疫共沉淀 赞同1添加评论 分享喜欢收藏申请转载 ...
1.可能存在假阳性和假阴性结果，需要进行验证。2.可能存在抗体特异性和亲和力的问题，需要选择合适的抗体和固相材料。3.可能存在样品处理和洗涤步骤中的损失和变异，需要优化实验条件。四、IP和Co-IP技术的应用 IP和Co-IP技术在生物药物领域有广泛的应用，可以用于研究蛋白质相互作用的机制、鉴定新的蛋白质交互作用伙...
1. 抗体需识别诱饵蛋白天然构象,需选择经过IP验证的抗体; 2. 若研究的目的蛋白没有商品化抗体,可对目的蛋白进行基因改造,与标签蛋白融合表达,使用标签抗体进行实验。 三、固相支持物选择——磁珠or琼脂糖珠? 四、孵育顺序——要想得率高,顺序很关键 五、洗脱方式——下游实验不同,洗脱方法不同 ok,今天的分享就...
(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;(3)必须在实验前预测目的蛋白...
3.可能存在样品处理和洗涤步骤中的损失和变异,需要优化实验条件。 四、IP和Co-IP技术的应用 IP和Co-IP技术在生物药物领域有广泛的应用,可以用于研究蛋白质相互作用的机制、鉴定新的蛋白质交互作用伙伴、筛选药物靶点等。以下是一些具体的应用案例: 1.蛋白质复合物的组成和结构分析:通过IP和Co-IP技术,可以分离出蛋...
3.可能存在样品处理和洗涤步骤中的损失和变异,需要优化实验条件。 四、IP和Co-IP技术的应用 IP和Co-IP技术在生物药物领域有广泛的应用,可以用于研究蛋白质相互作用的机制、鉴定新的蛋白质交互作用伙伴、筛选药物靶点等。以下是一些具体的应用案例: 1.蛋白质复合物的组成和结构分析:通过IP和Co-IP技术,可以分离出蛋...
3.可能存在样品处理和洗涤步骤中的损失和变异,需要优化实验条件。 四、IP和Co-IP技术的应用 IP和Co-IP技术在生物药物领域有广泛的应用,可以用于研究蛋白质相互作用的机制、鉴定新的蛋白质交互作用伙伴、筛选药物靶点等。以下是一些具体的应用案例: 1 .蛋白质复合物的组成和结构分析:通过IP和Co-IP技术,可以分离出...
蛋白参与的交互作用,都会用到一个共同的实验原理,叫免疫共沉淀(Immunoprecipitation),即用一个蛋白的特异性抗体去沉淀这个蛋白,与它存在结合的其他分子会被一起沉淀下来,接下来对沉淀物里的其他分子进行鉴定,核酸就用测序,蛋白就用质谱,就能分析得到与特定蛋白存在交互的其他分子。 理解了co-IP,ChIP和RIP是类似的原理...
普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品,但也宜用新鲜的蛋白样品为佳。服务基本流程 1. 裂解样品,准备蛋白样品; 2. 准备抗体-Protein A/G beads; 3. 样品,抗体-Protein A/G bends共孵育; 4. 洗脱; 5. WB检测。服务报告内容 WB结果和实验报告。