免疫组化IHC 实验流程:通常包括样本固定、包埋、切片、脱蜡水化、抗原修复、灭活、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色、复染、封片观察 12 个部分 1.样本固定 目的:确保组织样本的质量和完整性,为后续的免疫染色打下坚实基础。操作步骤:1)取材:从动物或人体取得所需的组织样本。对于组织块,要确保其大小适中,不...
移液器、恒温箱、修复仪、光学显微镜 免疫组化笔、计时器、孵育盒、染色架、粘附载玻片、盖玻片、洗瓶 操作步骤(石蜡包埋): (1)脱蜡和水化:石蜡切片置于新鲜二甲苯中,浸泡10分钟×3次;去除多余的液体后,置于无水乙醇中,浸泡3分钟×3次;去除多余的液体后,置于95%乙醇中,浸泡3分钟×2次;去除多余的液体后,置于...
免疫组织化学(Immunohistochemistry,简称IHC)是一种利用抗原与抗体之间特异性结合的特性,通过化学反应使标记抗体的显色剂(如荧光素、酶、金属离子或同位素)显色,从而确定组织细胞内抗原(包括多肽和蛋白质)位置的技术。实验流程01样本准备IHC技术可应用于石蜡切片、冰冻切片以及细胞涂片的检测。尽管多数抗体适用于石蜡切片,...
1)脱蜡与水化:将石蜡切片放置于60°烤箱烤片30-60min,这一步是为了使蜡片水分蒸发和石蜡融化,好让组织切片牢固地贴在玻片上。而后依次将其放入二甲苯I、II、III各10min,乙醇梯度(高至低:100%、95%、80%、70%)各2min,水洗5min(不要直接对着切片冲洗)。PBS洗3次,3 min/次。2)细胞通透与封闭:...
有试剂盒的做法 1. 烤片:将承载标本的玻片逐一放进玻片架子后放入可调节恒温箱,然后调至温度为68℃,约放置90分钟(下面需要垫纸,以防石蜡滴下来)(石蜡熔点为60℃)(用完之后需要拔电源); 2. 脱蜡、脱水:…
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【科研基础】IHCIF 免疫组化免疫荧光实验流程及问题解析 随心浪荡丶 4496 0 03:38 【冰冻切片】免疫组化IHC实验流程 赛维尔生物_Servicebio 4869 1 02:00 一抗、二抗要怎么选择?(一) 实验老司机 8081 0 59:18 免疫组化实验流程及常见问题解答 博奥龙龙宝博士 3879 3 36:17 OLYMPUS荧光倒置显微镜 ...
免疫组化实验主要包括石蜡切片的免疫组化技术(IHC-P)和冰冻切片的免疫组化技术(IHC-F),以下主要讲的是IHC-P。 实验步骤详解: 1,取材 颈椎脱臼法处死小鼠,打开腹腔,剪取所需的组织,切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透。 注意取材动作要迅速,不宜做太久的拖...
免疫组化(IHC)实验具体步骤及说明 一、试剂和溶液 乙醇:无水乙醇,95%乙醇,85%乙醇,70%乙醇抗原修复液: 0.01M的柠檬酸钠缓冲液:58.82g柠檬酸三钠及7.56g柠檬酸溶于200ml纯水,调pH至6.0,纯水1:100稀释为工作液3%过氧化氢-甲醇: 30%的过氧化氢与无水甲醇1:9稀释10X PBS: 80g NaCl,2g KCl, 14.4g ...
免疫组化IHC具体实验步骤IHC染色: 1、准备好的防脱片放在玻片铁架子上,放于65°C-70°C烧烤1h(脱蜡) 2、在二甲苯 号缸里脱蜡各10-15min,一般12min即可(第一次放入二甲苯缸要迅速,否则蜡又冻上了),然后放入无水乙醇——95%乙醇——75%乙醇,每缸各10-15min,一般12min即可 3、将架子放在水盆中,倾斜...