免疫组化IHC 实验流程:通常包括样本固定、包埋、切片、脱蜡水化、抗原修复、灭活、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色、复染、封片观察 12 个部分 1.样本固定 目的:确保组织样本的质量和完整性,为后续的免疫染色打下坚实基础。操作步骤:1)取材:从动物或人体取得所需的组织样本。对于组织块,要确保其大小适中,不...
基本步骤:将封闭液(如5%BSA或血清)滴加到组织切片上,确保均匀覆盖整个组织区域。室温或37°C孵育30分钟,让封闭液与组织切片充分作用。洗涤:用PBS或TBS等缓冲液洗涤切片,去除未结合的封闭液和杂质。3️⃣ 一抗孵育 选择一抗:根据实验目的选择特异性高、亲和力强的一抗,确保与目标抗原的种属来源、类型等相匹配。
二、免疫组化实验步骤1.烤片:将组织切片放置于65°C的烘箱中加热10-20分钟。此过程加速了脱蜡速率,提高了后续实验操作的效果。2.脱蜡和复水:将组织切片放入染色架中,依次放入各个染色缸进行脱蜡和复水。由于蜡不溶于水,如果脱蜡不完全,切片上残留的蜡会导致染色不均匀、阳性结果不稳定、真假难辨、以及背景染色...
二、实验步骤 1、烤片、脱蜡:65℃烤箱烘烤1h(冬季可多考30min),常规脱蜡、复水,放入水中浸泡5min。 2、封闭、孵一抗。将冷却的片子取出,用油笔或石蜡化圈,不要碰到组织。分别滴加100ul左右3%H2O2封闭液(覆盖组织),放至10min,PBS洗3次*3min,滴加5%BSA孵育10min,倾去液体(不洗)滴加一抗,4℃放至过夜。
「一」免疫组化(IHC)实验流程 免疫组化实验流程步骤:免疫组化的标本主要是组织标本和细胞标本两大类。组织标本中包括石蜡切片(标本制作的首选方法)和冰冻切片。一般而言,石蜡切片要求薄厚均匀,切片完整,且无褶无刀痕,相当考验实验人员的刀工,在此真心建议大家找专业公司进行切片,丰晖生物承接该业务。1)脱蜡...
免疫组织化学(Immunohistochemistry,简称IHC)是一种利用抗原与抗体之间特异性结合的特性,通过化学反应使标记抗体的显色剂(如荧光素、酶、金属离子或同位素)显色,从而确定组织细胞内抗原(包括多肽和蛋白质)位置的技术。实验流程01样本准备IHC技术可应用于石蜡切片、冰冻切片以及细胞涂片的检测。尽管多数抗体适用于石蜡切片,...
实验步骤 摊片🧪 首先,把切片放在65℃的摊片机上摊40分钟到1小时。这一步很重要,能确保切片平整。 脱蜡水化 🧼 接下来是脱蜡水化,这个过程有点复杂,但很重要。你需要用二甲苯Ⅰ和Ⅱ各洗10分钟,然后用100%乙醇Ⅰ和Ⅱ各洗10分钟,接着是95%、85%和75%的乙醇,每个浓度洗5分钟。这一步的目的是去除组织上...
免疫组化笔、计时器、孵育盒、染色架、粘附载玻片、盖玻片、洗瓶 操作步骤(石蜡包埋): (1)脱蜡和水化:石蜡切片置于新鲜二甲苯中,浸泡10分钟×3次;去除多余的液体后,置于无水乙醇中,浸泡3分钟×3次;去除多余的液体后,置于95%乙醇中,浸泡3分钟×2次;去除多余的液体后,置于75%乙醇中,浸泡3分钟×2次;蒸馏水冲...
IHC/免疫组化实验步骤~简单粗暴, 视频播放量 994、弹幕量 0、点赞数 13、投硬币枚数 2、收藏人数 35、转发人数 7, 视频作者 噗啦噗啦实验室, 作者简介 技术答疑小助手V:18570028002,相关视频:免疫组化和免疫荧光有什么区别?,IHC/免疫组化实验注意事项~,拔牙后仍附着的
免疫组化实验主要包括石蜡切片的免疫组化技术(IHC-P)和冰冻切片的免疫组化技术(IHC-F),以下主要讲的是IHC-P。 实验步骤详解: 1,取材 颈椎脱臼法处死小鼠,打开腹腔,剪取所需的组织,切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透。 注意取材动作要迅速,不宜做太久的拖...