IHC 实验流程：通常包括样本固定、包埋、切片、脱蜡水化、抗原修复、灭活、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色、复染、封片观察 12 个部分。图 3. 免疫组化（IHC）流程图[2]。1 样本固定 目的 1) 充分保存细胞成分，包括可溶性和结构性蛋白质；2) 防止细胞成分 (包括抗原和酶) 自溶和置换；3) 稳定细胞材料，避...
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1）脱蜡与水化：将石蜡切片放置于60°烤箱烤片30-60min，这一步是为了使蜡片水分蒸发和石蜡融化，好让组织切片牢固地贴在玻片上。而后依次将其放入二甲苯I、II、III各10min，乙醇梯度（高至低：100%、95%、80%、70%）各2min，水洗5min（不要直接对着切片冲洗）。PBS洗3次，3 min/次。2）细胞通透与封闭：...
抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量。 三、免疫组化实验步骤 1、60℃烤片30~60 min; 2、切片脱蜡水化:先将切片置于二甲苯中10 min,2次。然后依次在100%,95%,85...
有试剂盒的做法 1. 烤片:将承载标本的玻片逐一放进玻片架子后放入可调节恒温箱,然后调至温度为68℃,约放置90分钟(下面需要垫纸,以防石蜡滴下来)(石蜡熔点为60℃)(用完之后需要拔电源); 2. 脱蜡、脱水:…
免疫组化(IHC)实验具体步骤及说明 一、试剂和溶液 乙醇: 无水乙醇,95%乙醇,85%乙醇,70%乙醇抗原修复液: 0.01M 的柠檬酸钠缓冲液:58.82g 柠檬酸三钠及7.56g 柠檬酸溶于200ml 纯水,调pH 至6.0,纯水1:100 稀释为工作液3%过氧化氢-甲醇: 30%的过氧化氢与无水甲醇1:9 稀释10X PBS: 80g NaCl,2g KCl,...
免疫组织化学(Immunohistochemistry,简称IHC)是一种利用抗原与抗体之间特异性结合的特性,通过化学反应使标记抗体的显色剂(如荧光素、酶、金属离子或同位素)显色,从而确定组织细胞内抗原(包括多肽和蛋白质)位置的技术。实验流程01样本准备IHC技术可应用于石蜡切片、冰冻切片以及细胞涂片的检测。尽管多数抗体适用于石蜡切片,...
实验加油站 关注艾博士,科研不无聊~ 中立生命科学知识平台。关注【免疫组化IHC】观察脑片目标蛋白 | 实验步骤发布于 2022-10-31 10:43 · 578 次播放 赞同添加评论 分享收藏喜欢 举报 蛋白质科研免疫组化蛋白英语听力实验 ...
免疫组化IHC具体实验步骤IHC染色: 1、准备好的防脱片放在玻片铁架子上,放于65°C-70°C烧烤1h(脱蜡) 2、在二甲苯 号缸里脱蜡各10-15min,一般12min即可(第一次放入二甲苯缸要迅速,否则蜡又冻上了),然后放入无水乙醇——95%乙醇——75%乙醇,每缸各10-15min,一般12min即可 3、将架子放在水盆中,倾斜...