滴加荧光二抗以覆盖整个组织为宜,放入暗盒内避光室温孵育1h(注:此后所有步骤均需避光操作),孵育结束,用PBS缓冲液洗涤3次,每次5 min。 13.DAPI染色 采用DAPI染液室温避光染色10 min,用PBS洗涤3次,每次5 min。轻轻蘸干水分,滴加抗荧光衰减封片剂,盖上盖玻片。 14.观察 在荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察目的蛋白的...
免疫荧光(if)实验-染色操作步骤发布于 2024-07-02 11:14・IP 属地湖北 · 166 次播放 赞同添加评论 分享收藏喜欢 举报 免疫荧光免疫荧光实验免疫荧光染色生物实验科研试剂 写下你的评论... 还没有评论,发表第一个评论吧
步骤一:组织切片准备 将组织样本进行石蜡包埋,切成4-5微米厚的切片,贴在处理过的载玻片上。 将切片在60°C烘箱中烘干至少2小时。 步骤二:脱蜡水化 在Xylene中处理切片,去除石蜡。 通过一系列浓度递减的酒精水化切片。 步骤三:抗原修复 根据目标蛋白的性质选择合适的抗原修复方法(热源修复或酶解修复)。 步骤四:封闭...
滴加荧光二抗以覆盖整个组织为宜,放入暗盒内避光室温孵育1h(注:此后所有步骤均需避光操作),孵育结束,用PBS缓冲液洗涤3次,每次5 min。 13.DAPI染色 采用DAPI染液室温避光染色10 min,用PBS洗涤3次,每次5 min。轻轻蘸干水分,滴加抗荧光衰减封片剂,盖上盖玻片。 14.观察 在荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察目的蛋白的...
滴加荧光二抗以覆盖整个组织为宜,放入暗盒内避光室温孵育1h(注:此后所有步骤均需避光操作),孵育结束,用PBS缓冲液洗涤3次,每次5 min。 13.DAPI染色 采用DAPI染液室温避光染色10 min,用PBS洗涤3次,每次5 min。轻轻蘸干水分,滴加抗荧光衰减封片剂,盖上盖玻片。
滴加荧光二抗以覆盖整个组织为宜,放入暗盒内避光室温孵育1h(注:此后所有步骤均需避光操作),孵育结束,用PBS缓冲液洗涤3次,每次5 min。 13.DAPI染色 采用DAPI染液室温避光染色10 min,用PBS洗涤3次,每次5 min。轻轻蘸干水分,滴加抗荧光衰减封片剂,盖上盖玻片。
根据染色方法的不同,免疫荧光技术可分为直接法和间接法两种,前者是直接将目的蛋白与荧光标记的一抗结合的一种方法,后者则是先将目的蛋白与一抗结合后再与荧光标记的二抗结合的一种方法,其中以间接法最为常用。此外,免疫荧光技术亦有细胞免疫荧光(IF-IC)、石蜡切片免疫荧光(IF-P),冰冻切片免疫荧光(IF-F)之分,...
根据染色方法的不同,免疫荧光技术可分为直接法和间接法两种,前者是直接将目的蛋白与荧光标记的一抗结合的一种方法,后者则是先将目的蛋白与一抗结合后再与荧光标记的二抗结合的一种方法,其中以间接法最为常用。此外,免疫荧光技术亦有细胞免疫荧光(IF-IC)、石蜡切片免疫荧光(IF-P),冰冻切片免疫荧光(IF-F)之分,...