脱水、透明、封片操作同HE染色相应部分。 3、免疫荧光染色 水化后纯水摇洗,3min X 3次; 石蜡切片之抗原修复:微波炉,EDTA抗原修复液(pH8.0)或者Tis-EDTA抗原修复液(pH9.0),这里的修复液跟组化用的不一样,因为组化的是三步法,多了一级放大,所以组化的灵敏度高许多,但是荧光只有两步,灵敏度低,所以要从抗原修...
人肺癌类器官HE染色 二、免疫组化实验步骤 将HE染色步骤里脱蜡后的切片进行如下处理：1、抗原修复：加入3%H2O2浸泡10min，从而除去内源性的过氧化氢酶，然后倒掉H2O2，在清水中洗两次，再加入柠檬酸缓冲液，放入微波炉中蒸煮3min（中火），一般刚到沸腾即可，冷却至室温，然后再蒸煮一次，冷却至室温，蒸煮的目的是...
6、类器官鉴定-HE染色结果(以肺癌为例) 人肺癌类器官HE染色 二、免疫组化实验步骤 将HE染色步骤里脱蜡后的切片进行如下处理: 1、抗原修复:加入3%H2O2浸泡10min,从而除去内源性的过氧化氢酶,然后倒掉H2O2,在清水中洗两次,再加入柠檬酸缓冲液,放入微波炉中蒸煮3min(中火),一般刚到沸腾即可,冷却至室温,然后再蒸...
将免疫组化步骤里一抗孵育后的切片进行如下处理: 1、加荧光二抗:PBS浸洗3次,每次3min,吸干切片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中37℃孵育1h,PBS浸洗3次;注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量避光操作。 2、复染核:滴加DAPI避光孵育5min,对标本进行染核,用PBS清洗4次,洗去多余的DAPI; 3、封片...
我们辛辛苦苦养好的类器官,该如何做鉴定呢?通常是HE染色、免疫组化或免疫荧光。今天小爱带大家了解一下具体的染色步骤。 一、HE染色实验步骤 1、类器官收集 1)类器官收集(例如24孔板,收集6-8孔类器官,大约1000-2000个类器官) 移液器吸去培养基,每孔添加1-2ml左右,移液抢轻柔吹打基质胶,收集在15ml离心管中,...
HE染色实验步骤 一、类器官收集 1、 类器官收集(例如24孔板,收集6-8孔类器官,大约1000-2000个类器官) 移液器吸去培养基,每孔添加 1-2ml 左右,移液抢轻柔吹打基质胶,收集在 15ml 离心管中,4℃静置 10min。300g 4℃ 离心 5min 弃去上清。 2、 类器官清洗 ...
类器官鉴定-HE染色结果(以肺癌为例) 人肺癌类器官HE染色 二 免疫组化实验步骤 将HE染色步骤里脱蜡后的切片进行如下处理: 1、抗原修复:加入3%H2O2浸泡10min,从而除去内源性的过氧化氢酶,然后倒掉H2O2,在清水中洗两次,再加入柠檬酸缓冲液,放入微波炉中蒸煮3...
我们辛辛苦苦养好的类器官,该如何做鉴定呢?通常是HE染色、免疫组化或免疫荧光。今天小爱带大家了解一下具体的染色步骤。 一、HE染色实验步骤 1、类器官收集 1)类器官收集(例如24孔板,收集6-8孔类器官,大约1000-2000个类器官) 移液器吸去培养基,每孔添加1-2ml左右,移液抢轻柔吹打基质胶,收集在15ml离心管中,...
在进行类器官鉴定时，主要采用三种方法：HE染色、免疫组化和免疫荧光。下面详细讲解这三种方法的步骤。一、HE染色实验步骤 类器官收集 使用移液器从培养板中吸取类器官，通常取6-8个孔的类器官，数量大约为1000-2000个。移除培养基后，轻轻吹打基质胶，将类器官收集至15ml离心管中，在4℃下静置10分钟...
石蜡切片染色包括烤片、脱蜡、水化和染色步骤，HE染色、组化染色和免疫荧光染色各不相同。冰冻切片染色则无需烤片和脱蜡水化，但同样需要进行特定的染色步骤。最后，拍照前的准备工作包括检查树胶、封片剂和灰尘等对观察的影响，并调整拍照参数以确保高质量的图像。明场和荧光拍照时需注意参数的一致性，以...