1. 🔍 明确蛋白定位:在进行免疫荧光实验前,首先要了解并预测目标蛋白的定位。例如,使用肺动脉内皮细胞(BPAE)观察线粒体的显色时,采用不同波长的激光和物镜进行观察。如果单纯使用mito-tracker,可能无法清晰观察到线粒体内部结构和蛋白关系。因此,根据所需分辨率选择显微镜、荧光蛋白和探针非常重要。 🧹 减少背景...
免疫荧光实验经验总结: 1. 选择适当的抗体, 选择具有高亲和力和特异性的抗体至关重要,可以通过文献综述或试验验证来确定抗体的适用性。 2. 优化实验条件, 包括抗原修饰、抗体浓度、孵育时间等实验条件的优化,以确保信号强度和特异性。 3. 合理的阳性和阴性对照, 使用已知表达目标蛋白的阳性对照和不表达目标蛋白的阴...
另外,切片厚度的决定,直接关系到观察的清晰度。在实验过程中,可以依据现有的经验轻微调整步骤,以求达到最佳效果。 另外,进行免疫荧光染色前的抗原修复和封闭步骤同样不可忽视。这能够防止非特异性结合,从而提升实验数据的可信度。通过合理选择试剂并优化操作流程,您可以高效地完成免疫荧光实验。 免疫荧光技术不仅在基础研...
另外,切片厚度的决定,直接关系到观察的清晰度。在实验过程中,可以依据现有的经验轻微调整步骤,以求达到最佳效果。 另外,进行免疫荧光染色前的抗原修复和封闭步骤同样不可忽视。这能够防止非特异性结合,从而提升实验数据的可信度。通过合理选择试剂并优化操作流程,您可以高效地完成免疫荧光实验。 免疫荧光技术不仅在基础研...