1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。 六、HPLC纯度检测注意事项(SEC-HPLC) 1.色谱...
体积排阻色谱法(SizeExclusionChromatography,SEC)是一种基于分子尺寸差异的液相色谱技术。其核心原理是利用多孔凝胶固定相的孔径分布,通过分子在溶液中的流体力学体积(而非绝对分子量)实现分离,可以快速地确定样品混合物的复杂性,给出各个组分的大概分子量及分布。 高聚物分子在溶液中呈无规的线团,线团的体积和分子量有...
SEC-HPLC的原理基于样品中分子的大小差异。样品溶液通过填充有微孔固定相的色谱柱时,分子会根据其尺寸的不同在固定相中表现出不同的渗透特性。大分子会较快地通过色谱柱,因为它们能够进入微孔固定相并绕过固定相进行运动。相反,小分子会进入微孔固定相,减慢其在柱中的运动速度。因此,大分子进出色谱柱的时间较短,而...
HPLC原理主要基于分离的原理,即将混合物通过色谱柱,利用各成分的化学特性,通过在静态相和动态相的分配系数不同的特点,分离出各成分。这些性质通常是极性、疏水性、分子质量、极性官能团等。在分离过程中,样品注入进样装置,通过高压泵将其推进至色谱柱,走过填料的堆积形成的分散状态的静相,最后经过检测器,得到样品中的...
1.原理: SEC-HPLC是一种基于蛋白质分子大小的分离技术。它利用一个多孔的凝胶柱,较大的蛋白质分子无法进入凝胶内部,因此会在柱上流动速度较快,而较小的杂质分子则能进入凝胶内部,流动速度较慢。通过监测流出柱的吸光度信号,可以得到蛋白质样品的分子大小分布情况,从而评估样品的纯度。
体积排阻色谱法（SizeExclusionChromatography，SEC）是一种基于分子尺寸差异的液相色谱技术。其核心原理是利用多孔凝胶固定相的孔径分布，通过分子在溶液中的流体力学体积（而非绝对分子量）实现分离，可以快速地确定样品混合物的复杂性，给出各个组分的大概分子量及分布。高聚物分子在溶液中呈无规的线团，线团的体积和...
体积排阻色谱法(SizeExclusionChromatography,SEC)是一种基于分子尺寸差异的液相色谱技术。其核心原理是利用多孔凝胶固定相的孔径分布,通过分子在溶液中的流体力学体积(而非绝对分子量)实现分离,可以快速地确定样品混合物的复杂性,给出各个组分的大概分子量及分布。
HPLC的原理是将样品采用称为流动相的液体溶解,然后以高压将其从一个容器中泵入一块填充了固定相的柱内,通过固定相中的孔隙进行分离。固定相是由比试样固体颗粒略粗的颗粒组成的,这些颗粒可以吸附样品分子并使其在固定相与流动相之间发生多次分配。固定相和流动相可以根据样品进行选择和调整。通过缓慢和自然地将分子...
HPLC-SEC检测原理及蛋白残留检测相关应用 体积排阻色谱法(SizeExclusionChromatography,SEC)是一种基于分子尺寸差异的液相色谱技术。其核心原理是利用多孔凝胶固定相的孔径分布,通过分子在溶液中的流体力学体积(而非绝对分子量)实现分离,可以快速地确定样品混合物的复杂性,给出各个组分的大概分子量及分布。