SEC-HPLC的原理基于样品中分子的大小差异。样品溶液通过填充有微孔固定相的色谱柱时,分子会根据其尺寸的不同在固定相中表现出不同的渗透特性。大分子会较快地通过色谱柱,因为它们能够进入微孔固定相并绕过固定相进行运动。相反,小分子会进入微孔固定相,减慢其在柱中的运动速度。因此,大分子进出色谱柱的时间较短,而...
HPLC原理主要基于分离的原理,即将混合物通过色谱柱,利用各成分的化学特性,通过在静态相和动态相的分配系数不同的特点,分离出各成分。这些性质通常是极性、疏水性、分子质量、极性官能团等。在分离过程中,样品注入进样装置,通过高压泵将其推进至色谱柱,走过填料的堆积形成的分散状态的静相,最后经过检测器,得到样品中的...
HPLC的原理是将样品采用称为流动相的液体溶解,然后以高压将其从一个容器中泵入一块填充了固定相的柱内,通过固定相中的孔隙进行分离。固定相是由比试样固体颗粒略粗的颗粒组成的,这些颗粒可以吸附样品分子并使其在固定相与流动相之间发生多次分配。固定相和流动相可以根据样品进行选择和调整。通过缓慢和自然地将分子...
SEC-HPLC(尺寸排阻高效液相色谱)是一种基于分子大小分离的HPLC技术。它利用具有不同孔径的固定相(填料)对样品中的蛋白质进行分离,使得大分子先于小分子通过色谱柱,从而实现蛋白质的分离和纯度分析。 二、HPLC蛋白纯度分析原理 HPLC蛋白纯度分析的原理基于蛋白质在移动相(溶剂)中通过固定相(色谱柱填料)时的相对迁移速率。
高效SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,其基于蛋白质在分子筛柱中的分离原理。本文将介绍高效SEC-HPLC的原理、步骤和应用,并着重探讨优化和改进SEC-HPLC方法的关键因素。通过优化SEC-HPLC方法,我们可以提高蛋白质纯度的测定精度和灵敏度,为蛋白质研究和生物药物开发提供有力支持。1.高效SEC-HPLC的原理 高效...
1.原理: SEC-HPLC是一种基于蛋白质分子大小的分离技术。它利用一个多孔的凝胶柱,较大的蛋白质分子无法进入凝胶内部,因此会在柱上流动速度较快,而较小的杂质分子则能进入凝胶内部,流动速度较慢。通过监测流出柱的吸光度信号,可以得到蛋白质样品的分子大小分布情况,从而评估样品的纯度。
体积排阻色谱(SEC)是一项使用水相洗脱液基于尺寸分离蛋白质、寡核苷酸和其它复杂生物聚合物的技术,也被称为凝胶色谱、凝胶过滤色谱或凝胶渗透色谱,它是快速分离不同分子量混合物的有效方法。 体积排阻色谱的分离原理: 分子的体积排阻,样品组分和固定相之间原则上不存在相互作用,色谱柱的固定相是具有不同孔径的多孔凝胶...
对于可压缩的填料,必须根据流动相的流速选用适合的重力或者低压泵。软凝胶可以通过交联作用提高稳定性,这样就可以承受更高的流速和几兆帕的压强。凝胶过滤色谱分析时常用的刚性载体是:以亲水性固定相修饰的硅胶基质或者交联的有机聚合物。这些物质能在HPLC系统中使用,其机...
1、CE-SDS(非还原法)与SEC-HPLC方法的比较;报告者:元范佑、世民、卢坤、陈勇、CE-SDS(非还原法);原理简介:毛细管电泳驱动高压直流场毛细管首先填充凝胶,此时凝胶在毛细管内形成分子西卜,样品根据分子量大小在毛细管内移动速度分离,有效减少成分扩散,结果峰型尖锐,分离效率高。CE-SDS(非还原)、装置配置、毛细管电泳...