二、从HPLC-SEC(30cm色谱柱)转换为UHPLC-SEC(15cm色谱柱) 分析单克隆抗体时,从30 cm 的TSKgel G3000SWXL色谱柱转换为15 cm 的TSKge UP-SW3000色谱柱的分析示例如下图所示。在符合USP规定的分析条件下进行UHPLC分离,在确保分离度为同等以上的同时,分析时间减少了约50%,流动相也减少了约80%。 三、从HPLC-...
二、从HPLC-SEC(30cm色谱柱)转换为UHPLC-SEC(15cm色谱柱) 分析单克隆抗体时,从30 cm 的TSKgel G3000SWXL色谱柱转换为15 cm 的TSKge UP-SW3000色谱柱的分析示例如下图所示。在符合USP规定的分析条件下进行UHPLC分离,在确保分离度为同等以上的同时,分析时间减少了约50%,流动相也减少了约80%。 三、从HPLC-...
SEC分析实验表明(在使用蛋白质A亲和层析的额外纯化步骤后),聚合物的百分比下降至3%(图6)。SCE分析未再检测到更多污染物。所获结果清楚表明使用的这种方法是合适的。 图5.细胞收获后的单克隆抗体的HPLC-SEC分析和下游加工期间的初步澄清(条件列于表2中)。 图6.蛋白质A亲和层析后的单克隆抗体的HPLC-SEC分析和下...
在这种情况下,可转换为使用30 cm的TSKgel UP-SW3000色谱柱进行UHPLC分析(图2)。 图2.HPLC-SEC (30cm色谱柱×2支) 转换为UHPLC-SEC (30cm色谱柱) 的分离例 03 梯度分离时从HPLC转换为UHPLC 修订后的USP给出了使用梯度分离的其他色谱分析模式从HPLC转换为UHPLC的规定。进行梯度分离时,需要追加设定梯度体积、...
四、HPLC纯度检测样本准备(SEC-HPLC) 1.系统平衡 缓冲液选择:选择与样品缓冲液相匹配的洗脱液,确保样品在分析过程中保持稳定。 系统预热:将SEC-HPLC系统预热至设定温度,以确保分析过程中温度的一致性。 平衡色谱柱:用洗脱液通过色谱柱,直到基线稳定,确保色谱柱内填料完全湿润并达到平衡状态。
【用途】HPLC-SEC 或 UPLC 系统适用性系统使用性测试 【组成】静注人免疫球蛋白(5%) 【特性量值】 IVIG 单体及裂解物分离度 R≥1.8 IVIG 裂解物 Area%≥3.0% 系统适用性测试用 【使用方法和要求】本品应 2~8℃保存。使用时首先应平衡至室温,测定方法按规定的人免疫球蛋白产品分子大小分布方法进行时,稀释 ...
国家药品标准物质使用说明书 V1.0 HPLC-SEC 系统适用性(免疫球蛋白)国家对照品 National reference for HPLC-SEC system suitability test (immunoglobulin) 【类别】生物参考品 【批号】280031-201901 【性状】液体 【用途】HPLC-SEC或 UPLC系统适用性系统使用性测试 【组成】静注人免疫球蛋白(5%) 【特性量值】 IVI...
HPLC-SEC系统适用性(免疫球蛋白)国家对照品基本信息 标准物质销售提示 关于产品所有GBW、GSB开头的标准物质,均提供“国家标准物质证书”。因产品种类繁多,北纳标物网上架的只是部分产品,详情请咨询在线客服。 关于技术北纳标物网客服工作日8:30--18:00在线,欢迎随时咨询标准物质价格、标准物质证书、标准物质检测检验等...
但在进行微量分析时候,SEC色谱柱中的蛋白质有时会因非特异性吸附而导致定量和重现性出现问题。另外,在使用光散射分析多聚体或质谱分析时,有时会因为柱流失产生的干扰物质而无法进行精确检测。东曹新一代UHPLC-SEC色谱柱TSKgel UP-SW3000-LS可以解决此类分析难题。
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用,导致峰展宽、拖尾甚至不出峰等现象,影响蛋白的准确定量。为了解决这一问题,可以在流动相中添加减少相互作用的添加剂,例如提高盐浓度、添加精氨酸和有机溶剂等。