1、HIV-1病毒通过gp120与CD4T淋巴细胞表面的主要受体CD4结合,然后将病毒的基因(RNA)、蛋白及酶等释放到宿主细胞内; 2、逆转录酶将病毒RNA转录成DNA,病毒DNA在整合酶的作用下插入宿主细胞的基因组中,此时病毒的DNA也称为原病毒; 3、原病毒转录成mRNA,mRNA从细胞核进...
慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具腺病毒(AdV)是一种无包膜的线性双链DNA病毒,在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体...
慢病毒载体是以HIV-1为基础发展起来的基因载体,主要由包装载体和转移载体组成。包装载体携带的基因能够控制合成病毒颗粒蛋白;转移载体上除含有基因表达载体必须的组成(如目的基因)外,还有病毒包装、逆转录和整合所需的基因序列。下图是科研人员利用慢病毒载体系统培育转基因荧光鼠的主要过程。请分析回答。(1)图中涉及的...
慢病毒载体不表达任何HIV-1蛋白,免疫原性低,在注射部位无细胞免疫反应,体液免疫反应也较低,不影响病毒载体的第2次注射。 2 实验所应用的慢病毒载体属于“第3代”慢病毒载体,其基因组的3’LTR的增强子功能发生了缺失,从而形成了所谓的“自灭活”(Self-inactivation,SIN),即该病毒基因组整合到细胞基因组后,不会...
达人血清白蛋白(pBLG—ALB)等,研究以HIV.1为骨架的慢病毒载体FUGW在其假病毒的转录本中内含子的 剪切情况.将慢病毒载体制备成假病毒后抽提其病毒RNA,通过逆转录和PCR验证其内含子剪切保留情况; 同时,在相对应的慢病毒假病毒介导的转基因小鼠中也进行类似的PCR验证.在制备假病毒的转录过程中, ...
HIV-1包膜蛋白ENV慢病毒载体的构建及表达
目的介绍人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficieney virus-1,HIV-1)载体的构建及转染大鼠脊髓神经干细胞的实验方法。方法将含有绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的4种质粒通过293T细胞构建成GFP-HIV载体。用Elisa法及Hela细胞分别验证其高浓度及强感染力后将其转染大鼠脊髓神经干细胞。结果GFP-HIV载体浓度...
当基于抗HIV-1慢病毒的基因治疗(例如双结合抗HIV-1慢病毒载体(Cal-1,LVsh5/C46))用于抑制HIV-1复制时,有必要定量包含Cal-1DNA的细胞和包含野生型HIVDNA的细胞。这对于从感染HIV-1的患者获取的细胞来说是特别正确的。我们面临在DNA水平区分HIV-1和Cal-1的困难。目前可商业获得的基于PCR的测定法不能区分HIV-...
慢病毒载体与基因治疗 近几年来 ,慢病毒载体受到高度重视 ,慢病毒载体来源于人类免疫缺陷病毒 HIV- 1、HIV- 2、SIV,具有转染分裂和非分裂的 T细胞、树枝状细胞、造血干细胞及巨噬... 杨玉芳 - 《国际病毒学杂志》 被引量: 5发表: 2003年 慢病毒载体与基因治疗 疱疹病毒载体、痘苗病毒载体等.近几年来,慢...
1.一种基于HIV-1载体的慢病毒滴度检测卡,包括卡体外壳、试纸条和背板,所述卡体外壳上设有加样孔和检测窗,所述试纸条粘贴在背板上,所述卡体外壳与背板扣合,所述试纸条采用搭接的方式,依次设有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,其特征在于,所述金标垫上结合有金标液; 所述硝酸纤维素膜上设有检测线T...