观察发现,病毒粒子在进入细胞后沿微管运动并逐渐在核膜外侧微管组织中心(MTOC)附近聚集,导致邻近核膜发生凹陷;病毒粒子趁势进入凹陷区域;在ESCRT-III系统参与下,变形核膜开始被修复,凹陷边缘两端生成的新核膜向中间延伸形成核膜囊泡结构并将病毒粒子包裹;继而,囊泡内侧膜破裂,释放病毒粒子入核。 HIVVpr-mCherry病毒NL4-...
HIV-1env进入抑制剂细胞-细胞融合高内涵药物筛选目的 构建一种基于HIV实验室株NL4-3包膜蛋白env的非感染性,可视化细胞-细胞融合模型,用于检测HIV-1进入抑制剂的抑制活性.方法 构建可同时表达HIV NL4-3 env及GFP的真核表达质粒pAAV-IRES-GFP-NL4-3,瞬时转染293T细胞,使293T细胞同时表达2种蛋白(293T/NL4-3/GFP...
网络出版时间: 网络出版地址:◇实验方法学◇VSVG/HIV1NL43Luc假病毒筛选抗 HIV 1药物的条件优化及应用王 萍1,2 ,陈欢2,3 ,罗荣华 2 ,卿晨1 ,张高红 2 ,郑永唐 2(1.昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,云南 昆明 650500;2.中国科学院昆明动物研究所,中国科学院和云南省动物模型与人类疾病...
We have also shown that while some strains of HIV-1, such as NL4-3, induce apoptosis of infected CD4+ T cells, other strains, such as HIV-1 IIIB, do not. Interestingly, we show here that infection of CD4+ T cells with HIV-1 NL4-3, but not IIIB, inhibited activation and ...
据报道,SLFN5在N-末端含有一个DNA结合结构域,这增加了SLFN5通过直接结合抑制HIV LTR启动子的可能性。为验证这一假设,作者使用转染了SLFN5-Myc和NL4-3luc.RE-DNA的HEK293T细胞进行染色质免疫沉淀(ChIP)测定(ChIP-seq和ChIP-qPCR)。 图5:SLFN5通过与U5-R区域结合抑制HIV-1 LTR转录并减少RNA PoL II募集 ...
据报道,SLFN5在N-末端含有一个DNA结合结构域,这增加了SLFN5通过直接结合抑制HIV LTR启动子的可能性。为验证这一假设,作者使用转染了SLFN5-Myc和NL4-3luc.RE-DNA的HEK293T细胞进行染色质免疫沉淀(ChIP)测定(ChIP-seq和ChIP-qPCR)。 图5:SLFN5通过与U5-R区域结合抑制HIV-1 LTR转录并减少RNA PoL II募集 ...
为了更好地理解调控HIV-1整合酶进入NR和核质的机制的相关性,我们调查了HIV-1是否通过内吞作用进入HeLa细胞,通过在3小时感染之前用细胞渗透性动力蛋白抑制剂dynasore(DNS)预处理细胞30分钟,阻止包覆在质膜上的clathrin钩体从质膜分离48。 在二甲基亚砜(DMSO)对照组中,IN-2出现在细胞质、NEIs和核质中,而在阻止内吞...
据报道,SLFN5在N-末端含有一个DNA结合结构域,这增加了SLFN5通过直接结合抑制HIV LTR启动子的可能性。为验证这一假设,作者使用转染了SLFN5-Myc和NL4-3luc.RE-DNA的HEK293T细胞进行染色质免疫沉淀(ChIP)测定(ChIP-seq和ChIP-qPCR)。 图5:SLFN5通过与U5-R区域结合抑制HIV-1 LTR转录并减少RNA PoL II募集 ...
报告基因的表达水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系.比较3种实验条件下不同阳性药物抑制VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc的半数有效剂量浓度EC50,发现第3种条件最优.而用该假病毒对合成化合物进行筛选,发现其EC50与病毒HIV-1_(ⅢB)所得EC_(50)基本一致.结论成功建立并优化了基于VSVG/HIV-1_(NL4-3)Luc假病毒的抗HIV...
将优化后的系统用于针对不同靶点合成的化合物筛选,并与活病毒 HIV1ⅢB所得结果进行比较,发现两者的EC50基本一致,说明 VSVG/HIV1NL4-3Luc 是一个安全、有效地抗HIV1 药物筛选模型。1 材料与方法1.1 细胞、质粒和化合物 人胚肾细胞(293T)、人宫颈癌细胞(HeLa)和猫肾细胞(CRFK) 均购自中国科学院上海生命科学...