上期介绍了蛋白纯化的三种方法，目前实验中最常用方法的是His-tag亲和层析。His-tag非常小对目的蛋白本身特性几乎没有影响且免疫原性较低，纯化的目的蛋白可以直接注射动物，另外，还可与其他亲和标签构成双亲和标签，应用于多种表达系统，因此是蛋白纯化的首选标签。本期小编就来详细讲讲His-tag镍（Ni）柱亲和层析的...
原因:主要是因为蛋白和柱子结合能力不足导致的,也可能是目的蛋白无His-tag序列或者结合条件不对导致。 (1)His标签没有充分暴露:在蛋白中加入适量的尿素或盐酸胍等变性剂,若可以挂柱则尝试在变性条件下纯化,如果不能接受蛋白变性纯化,那可以在上游分子水平改变His的长度或位置,让His暴露在蛋白表面。 (2)His标签是否...
组氨酸标签也称His-tag,是一种最简单、应用最广泛的纯化标签,具有六个或更多连续的组氨酸残基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能构成表位利于检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸标签的特点可总结为以下几点: 1.His标签分子量小,只有~0.84K...
His-tag单抗可以用来鉴定His-tag的蛋白质的表达情况(如目的蛋白的相对表达量、分子量)、在细胞中的定位以及其它特性。His-tag 作为蛋白纯化时的首选标签,其优势在于:(1) N-端的 His-Tag 与细菌的转录翻译机制兼容,有利于蛋白表达;(2)采用 IMAC(固定化金属离子亲合...
His-Tag是一段由6个组氨酸残基(His)组成的多肽序列。His-Tag可以在目标蛋白质的N端、C端或内部位置插入,使得目标蛋白与His-Tag融为一体。His-Tag具有亲和力,可以与金属离子(如Ni2+、Co2+)发生配位作用,形成稳定的His-Tag-金属离子络合物。通过His-Tag与金属离子之间的相互作用,可以实现对目标蛋白的快速纯化和鉴定...
用途范围 His-tag Protein Purification 容量 5ml 反应次数 10次 品牌 海狸Beaver 产品名称 10次反应试剂盒(5mL) 货号 70502-K10 浓度 10%(v/v)稳定保存 交易保障 买家保障 卖家承诺履约合规诈骗保赔,保障商品交易安全 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因商品参加活动等情况发...
His Tag（组氨酸标签）是蛋白质重组技术中常用的一种标签，由6到10个连续的组氨酸（His）残基组成，其中，最常用的His标签是6xHis标签。该标签的分子量较小，约为0.8 kDa，通常插入在目的蛋白的C末端或N末端。His Tag在蛋白质纯化和检测中起着重要作用，具有以下特点和用途：特点 分子量小：His Tag的分子量小...
该填料由带有次氮基三乙酸(NTA)配基的高度交联凝胶制成,该填料可以在含有还原剂的情况下依然具有良好的性能,专为大规模下游纯化组氨酸标签(his-tag)蛋白而设计。 高耐压:Nickel Agarose Extrachel™ 大包装填料 Nickel Agarose Extrachel™ 是一种用聚螯合剂配体制造的高容量凝胶,该产品是专为在 EDTA 和 DTT ...
与组氨酸标签(His-tag) 以及具有自我剪切功能的Ssp dnaB 微型蛋白质内含子进行融合表达。表达产物经Ni-Sepharose 亲和层 … s.antpedia.com|基于64个网页 2. 多聚组氨酸标签 产品列表 ... 甲氧基胺盐酸盐 Methoxyammonium chloride多聚组氨酸标签His-Tag3-氨基巴豆酸异丙酯 Isopropyl 3-aminocroto… ...
His-Tag是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,可与多种蛋白形成融合蛋白,基于组氨酸的咪唑环与金属离子(如镍离子)起化学作用而生成螯合的原理, 可以利用Ni琼脂糖树脂纯化His-Tag融合蛋白。由于分子量较小, 并且较容易分离和纯化,His-Tag融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前融合标签中使用...