原因:主要是因为蛋白和柱子结合能力不足导致的,也可能是目的蛋白无His-tag序列或者结合条件不对导致。 (1)His标签没有充分暴露:在蛋白中加入适量的尿素或盐酸胍等变性剂,若可以挂柱则尝试在变性条件下纯化,如果不能接受蛋白变性纯化,那可以在上游分子水平改变His的长度或位置,让His暴露在蛋白表面。 (2)His标签是否丢失:大
His-Tag蛋白纯化原理:组氨酸(His)的残基上带有1个咪唑基团,可以和Ni2+、Co2+等过渡金属离子形成配位键而选择性的结合在金属离子上,这些金属离子能够用鳌合配体固定在层析介质上,因此带有His标签的蛋白在经过装配了金属离子的层析介质时可以选择性的结合在介质上,而其他的杂质蛋白则不能结合或仅能微弱结合。结合在...
Mag-Beads His-Tag蛋白纯化磁珠是针对纯化His标签蛋白而研制的一种新型纯化材料,可通过特有的磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行His-tag蛋白的纯化。 特点1. 直接对粗蛋白进行纯化,降低了设备、人力、时间成本,并更适合大规模蛋白...
众所周知，His tag（组氨酸标签）技术在蛋白质纯化领域占据着举足轻重的地位。这种技术常被用于分离和纯化重组蛋白，成为生物化学和分子生物学研究中的得力助手，助力科研人员高效获取目标蛋白并推动相关研究的发展。在上世纪70年代，蛋白质分离和纯化技术尚处于初级阶段，迫切需要更高效、更纯净的分离方法。金属螯合亲和层...
Ni柱中的氯化镍可以与有HIs(组蛋白)标签的蛋白结合,也可以与咪唑结合。 步骤是:过柱子前可以选择Ni柱重生,也就是往柱子里倒氯化镍,一个柱长体积就行了,然后平衡柱子,拿你自己的buffer,给蛋白提供最适的环境,我一般平衡4个柱长,然后蛋白上样,你可以让他自己挂,这样挂柱子的效果好一些,如果流速太慢,可以加个...
中文名称:His-Tag蛋白纯化磁珠(镍离子) IDA-Nickel 产品编号:M2300单位:瓶 品牌:Solarbio His-tag Protein Purification磁珠(组氨酸标签蛋白纯化琼脂糖磁珠)是专为高效、快速纯化组氨酸标签蛋白而设计的一种新型功能化材料,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,显著地简化了纯化工艺,降低了设备...
His-Tag 蛋白纯化磁珠(Magarose-IDA/NTA/TED)针对纯化 His 标签蛋白而研制的一种新型纯化介质,具有高效、快速、方便等特点,可通过磁分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行 His-tag 蛋白的纯化。 二、产品特性 产品名称 Magarose-IDA/...
Mag-Beads His-Tag蛋白纯化磁珠是针对纯化His标签蛋白而研制的一种新型纯化材料,可通过特有的磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行His-tag蛋白的纯化。 特点 1. 直接对粗蛋白进行纯化,降低了设备、人力、时间成本,并更适合大规模蛋...
1. IMAC与His-Tag技术概述 1.1. IMAC技术介绍 固定化金属离子亲合层析（IMAC），也被称为金属螯合亲合层析，是一种专为原核蛋白纯化设计的技术。通过利用蛋白质表面特定的氨基酸与金属离子间的相互作用，该方法能高效地纯化蛋白质。这些相互作用涵盖了配价键结合、静电吸附以及共价键结合等多种方式，其中以包含6个...
1、什么是His-tag? His-tag单抗又叫6*His-tag单抗,或6*His单克隆抗体,用小鼠制备,His可被镍柱吸附,用于纯化重组蛋白,无论表达的蛋白是可溶的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和层析(IMAC)纯化。金属螯合亲合层析,又称固定化金属离子亲合层析(Immobilized metal ion ...