(6)杂蛋白是目的蛋白的截断蛋白:检查是否存在可能的内部翻译起始位点(若 HisTag 序列构建于目的蛋白 C 端),或翻译提前终止(若 HisTag 序列构建于目的蛋白 N 端);避免目的蛋白在纯化过程中降解,如保持在 4℃进行操作,使用蛋白酶抑制剂等。 珠海舒桐可提供从密码子优化、载体构建到重组蛋白表达及纯化的大肠杆菌蛋...
His-Tag蛋白纯化原理:组氨酸(His)的残基上带有1个咪唑基团,可以和Ni2+、Co2+等过渡金属离子形成配位键而选择性的结合在金属离子上,这些金属离子能够用鳌合配体固定在层析介质上,因此带有his标签的蛋白在经过装配了金属离子的层析介质时可以选择性的结合在介质上,而其他的杂质蛋白则不能结合或仅能微弱结合。结合在...
用途范围 His-tag Protein Purification 容量 5ml 反应次数 10次 品牌 海狸Beaver 产品名称 10次反应试剂盒(5mL) 货号 70502-K10 浓度 10%(v/v)稳定保存 交易保障 买家保障 卖家承诺履约合规诈骗保赔,保障商品交易安全 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因商品参加活动等情况发...
His-Tag蛋白纯化原理:组氨酸(His)的残基上带有1个咪唑基团,可以和Ni2+、Co2+等过渡金属离子形成配位键而选择性的结合在金属离子上,这些金属离子能够用鳌合配体固定在层析介质上,因此带有his标签的蛋白在经过装配了金属离子的层析介质时可以选择性的结合在介质上,而其他的杂质蛋白则不能结合或仅能微弱结合。结合在...
表1. 不同蛋白纯化标签介绍 浓缩的精华,纯化的领头羊 His-Tag 为何会逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品最有效的技术之一。其主要优势在于: 高序列兼容性:N-端的His-tag与细菌的转录翻译机制兼容,有利于蛋白表达; 小序列影响小:His-tag非常小,His-tag对目的蛋白本身特性几乎没有影响,不会改变目的蛋白本身的...
强于普通的肽,1988年他第一次用这样的方法纯化了带六个组氨酸标签的多肽,无论是在天 然还是变性条件下一次亲和纯化都得到很好效果,此后表达带六个组氨酸标签的蛋白配合IMAC变得非常普遍,相对而言,不带标签的蛋白纯化就非常困难,所以 表达带六个组氨酸标签的蛋白配合IMAC纯化变成最常用而且最有效的研究蛋白结构和功能的...
图2. HisSep Ni-NTA Agarose Resin纯化效果图 FAQ 01His标签蛋白不挂柱怎么办？1.His标签是否丢失 大肠杆菌表达外源蛋白过程中，常出现序列丢失的现象，若是标签丢失，蛋白自然就无法挂柱了。可采用Western-Blot方法通过His抗体检测目标蛋白是否存在His标签。若可以检测得His-tag，那么就有可能与蛋白质的结构有关...
图2. HisSep Ni-NTA Agarose Resin纯化效果图 FAQ 01 His标签蛋白不挂柱怎么办? 1.His标签是否丢失 大肠杆菌表达外源蛋白过程中,常出现序列丢失的现象,若是标签丢失,蛋白自然就无法挂柱了。可采用Western-Blot方法通过His抗体检测目标蛋白是否存在His标签。若可以检测得His-tag,那么就有可能与蛋白质的结构有关...
His-Tag 表达蛋白纯化原理、方法和问题分析组氨酸标签蛋白的纯化 His-Tag融合蛋白是目前最常见的表达方式，而且很成熟，它的优点是表达方便而且基本不影响蛋白的活性，无论是表达的蛋白是可溶性的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和色谱去（IMAC）纯化。2．1 IMAC(Immobilized Metal-ion affinity chromatography)是Porath ...
1、什么是His-tag? His-tag单抗又叫6*His-tag单抗,或6*His单克隆抗体,用小鼠制备,His可被镍柱吸附,用于纯化重组蛋白,无论表达的蛋白是可溶的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和层析(IMAC)纯化。金属螯合亲合层析,又称固定化金属离子亲合层析(Immobilized metal ion ...