AAE旨在克服基于WB方法在评估多克隆抗体对HCP覆盖率方面的技术缺陷,该方法首先将抗HCP抗体偶联到层析填料上,然后上样HCP样品,富集过程中HCP抗体可捕获识别HCP,而未识别的HCP则被流穿,通过多次重复循环,直到没有额外的HCP结合为止;最后通过低pH等条件洗脱、富集HCP。将富集前的HCP和富集后HCP进行二维电泳-染色分析(AAE...
上一讲介绍到传统的基于免疫印迹(Western blot,WB)的HCP抗体覆盖率验证方法,包括双向凝胶电泳-免疫印迹(2-D SDS-PAGE-Western blot, 2D-WB)(见图1)、双向差异荧光印迹(2D differential in blot electrophoresis, 2D-DIBE)等;由于HCP覆盖率低、重复性差等问题,逐渐无法满足NDA、BLA等注册申报的要求。 图1. Left...
HCP抗体覆盖率验证 夹心法ELISA检测试剂盒是检测HCP残留的金标准。然而,这种方法高度依赖于试剂盒中抗HCP抗体对于总宿主细胞蛋白的覆盖率。 若ELISA检测中使用的抗体覆盖率不足,可能在最终产品中漏检某些残留的HCP,进而可能在用药患者中引起免疫反应和其他药物安全性问题。
商品化的ELISA试剂盒中的多克隆抗体能够识别大多数HCP混合物中的蛋白质,但可能无法检测特定制造过程中的HCP成分。通过ELISA法检测HCP残留的准确性主要依赖于多克隆抗体对HCP的覆盖率。因此,监管机构要求在治疗性蛋白产品在商业化申报之前,用于检测HCP残留的多克隆抗体对于产品中HCP的覆盖率需要经过验证。 03-HCP抗体覆盖...
在线分享 | HCP抗体覆盖率验证分析 宿主细胞蛋白(HCPs)是生物制品生产过程中产生的关键工艺相关杂质之一,其残留往往影响患者的安全性和产品的有效性,因此是一项关键质控指标。 ELISA方法被认为是HCP残留检测的金标准,具有操作简单、灵敏度高、通量高等优势,被广泛用于生物制品研发工艺开发、验证和放行检验过程。
ELISA方法被认为是HCP残留检测的金标准,具有操作简单、灵敏度高、通量高等优势,被广泛用于生物制品研发工艺开发、验证和放行检验过程。 多克隆抗体是ELISA试剂盒中的关键原料,其覆盖率的水平会直接影响试剂盒的质量,而常用的抗体覆盖率方法主要涉及2D/WB、IMBS/2D、IMBS...
在线分享 | HCP抗体覆盖率验证分析 宿主细胞蛋白(HCPs)是生物制品生产过程中产生的关键工艺相关杂质之一,其残留往往影响患者的安全性和产品的有效性,因此是一项关键质控指标。 ELISA方法被认为是HCP残留检测的金标准,具有操作简单、灵敏度高、通量高等优势,被广泛用于生物制品研发工艺开发、验证和放行检验过程。
ELISA方法被认为是HCP残留检测的金标准,具有操作简单、灵敏度高、通量高等优势,被广泛用于生物制品研发工艺开发、验证和放行检验过程。 多克隆抗体是ELISA试剂盒中的关键原料,其覆盖率的水平会直接影响试剂盒的质量,而常用的抗体覆盖率方法主要涉及2D/WB、IMBS/2D、IMB...
APTBIO协助国内1000+家企业进行了生物药物的结构表征确证工作,其中就包含了非常关键的HCP抗体覆盖率验证。APTBIO目前已完成的HCP抗体覆盖率验证项目涉及到了主流品牌的商业化ELISA试剂盒抗体和委托单位自研抗体,积累和总结了大量的样品前制备、双向电泳方法优化以及免疫印迹的经验,是深受广大客户信任的药物研发服务供应商。
ELISA方法被认为是HCP残留检测的金标准,具有操作简单、灵敏度高、通量高等优势,被广泛用于生物制品研发工艺开发、验证和放行检验过程。 多克隆抗体是ELISA试剂盒中的关键原料,其覆盖率的水平会直接影响试剂盒的质量,而常用的抗体覆盖率方法主要涉及2D/WB、IMBS/2...