2.7 pBCX对H1N1亚型猪流感HA基因在大肠杆菌中高效可溶表达 2.7.1引物的设计与合成根据测定的H1N1亚型猪流感HA基因序列设计1对引物,即 HAup/HAdn ,该片段理论跨度为1701bp ,编码566个氨基酸,在 HAup5’端加上BamHI酶切位点(斜体)和保护碱基,在HAdn加 上Sail酶切位点(斜体)和终止密码。引物由上海博亚生物工程...
基因序列siv鉴定分离广东分析 摘要 从广东省内25个猪场3060日龄有呼吸道症状的仔猪,通过棉签拭 子法进行样品采集,鸡胚接种后分离到27株病毒,初步鉴定为SIV,经 传代和处理后,将其中7株送往北京国家流感中心进行亚型鉴定,确定均 为HIM亚型毒株。对SGDI,SGD2,SGD63个毒株进行形态学、部分 理化特性和生物学特性方面的...
阅读框架 毫克 小时 分钟 毫升 转|分 H9N2亚型禽流感HP株HA和NA基因克隆、序列分析及免疫原性研究 1引言 禽流感(Avianinfluenza,hi)是由A型禽流感病毒(Avian influenzavirus,AⅣ)引起的严重 危害养禽业的高度传染性疾病。禽流感病毒属于正黏病毒科,流感病毒属【l’2】。根据病毒表面血凝 素(Hemagglutinin,HA)的...
将mHA 基因克隆至pRB21质粒中，构建pRB21-mHA 质粒文库，并经PCR 鉴定和测序分析其多样性。结果显示，随机挑选200个菌落检测pRB21-mHA 质粒文库的阳性率为92.5%，且均呈现2种亲本病毒HA 基因的碱基特性且均不相同，表明构建了HA 基因序列呈现多样性的pRB21-mHA 质粒文库。利用pRB21-mHA 质粒文库转染预先感染缺陷...
在又一个实施方案中,亲和标签选自由cd34富集标签、谷胱甘肽-s-转移酶(gst)、钙调蛋白结合蛋白(cbp)、蛋白c标签、myc标签、halotag、ha标签、flag标签、his标签、生物素标签和v5标签组成的组,和/或其中标记物是荧光蛋白。在另一个实施方案中,共价连接的部分选自由炎性剂、细胞因子、毒素、细胞毒性分子、放射性...
下载序列 pCMV3-N-HA: • CMV 启动子: 碱基 250-837 • 增强子: 碱基 838-1385 • SV40 早期启动子: 碱基 2282-2651 • 潮霉素 ORF: 碱基 2669-3694 • pUC 原点: 碱基 4337-5010 • 卡那霉素 ORF: 碱基 5084-5899 ORF 插入位点 ...
H9N2亚型禽流感病毒辽宁分离株HA1蛋白的原核表达
(粗体为保护碱基,粗体下划线为酶切位点,粗斜体为Kozak序列);检测基因表达的RTPCR引物序列如下:GAPDH上游5’ CAGCCTCGTCCCGTAGACA 3’,下游5’CGCTCCTGGAAGATGGTGAT 3’,Cdh15上游5’GGACCTTCGGGACAACAT 3’,下游5’CAGCCTCCAAGCCATCAC 3’,Myogenin上游5’GAAGCGCAGGCTCAAGAAAGT 3’,下游5’ GATTGTGGGCG...
需要说明的是,烟草ntvha-a1基因,包括2454个碱基,碱基序列如seqidno.1所示,具体碱基序列为: atggagtacatagacaacatgccgccaatggatctgatgcgctcggagaagatgactttcgttcagcttattattccttttgagtccgctcatcgtgctgtcacttaccttggccaactcggacttctccaattccgtgatctaaatgccgaaaagagccctttccagagaacatttgtaaaccaggtaaaaagatgcgccgagatgtcaaga...
Cas9 切割位点位于目标序列 (target sequence)内,离 PAM(NGG)区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。 因为反应需要添加 RNA(sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA),整个体系,包括 Cas9 酶都不能含有任 何 RNase 活性。其中,Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和 非...