Co-IP和GST pull-down实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的。不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围及实验难度上均有差异。 Co-IP 反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行CoIP检测时,样本一般...
Co-IP和GST pull-down实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的。不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围及实验难度上均有差异。 Co-IP:反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行CoIP检测时,样本一般...
综合而言, GST pull-down实验和CoIP实验其实是相互补充的两种实验方法,通过二者结合,我们才能更准确地了解两个蛋白之间的真实互作情况。 对于很多文献中 CoIP和 GST pull-down实验结果图,许多刚踏入科研领域的小伙伴可能不是很熟悉,看不大明白。今天咱们就根据文献案例来具体展示一下两种实验结果的分析过程。 本次以...
Co-IP和GST pull-down实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的。不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围及实验难度上均有差异。 Co-IP:反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行CoIP检测时,样本一般...
从两者的实验原理我们不难发现,gst pull-down和coip实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的;不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围上,以及实验难度...
从两者的实验原理我们不难发现,GST pull-down和CoIP实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的;不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围上,以及实验难度...
区别:GST pull-down一般用于体外实验,非生理状态下的验证,蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存在一定差异,一般用于体外验证两个已知蛋白的直接相互作用。co-IP实验反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行co-IP检测时,样本一般源于非变性裂解细胞,活细胞状态下蛋白质之间的相互作用被保持,所以其反映...
Co-IP,GST pull down和酵母双杂交是研究蛋白互做最常用的三种方法,一般常用酵母双杂交来筛选,用Co-IP和GST pull down用来验证。研究不仅在整体蛋白层面,还包括蛋白的结构域层面,GST pulldown是用来验证蛋白X与Y是直接结合的,而Y2H和Co-IP结果则还有间接作用以及非特异性作用。
在蛋白质相互作用研究中,GST Pull-Down是一种常用的体外实验方法,主要用于验证已知蛋白质之间的直接相互作用。与免疫共沉淀(Co-IP)相比,GST Pull-Down具有实验流程简单、操作难度低等优点,但其在非生理状态下的测试可能会影响蛋白质的结构和功能。尽管如此,GST Pull-Down在蛋白质相互作用的初筛和验证中仍具有重要价...
图1 Co-IP 原理示意图 GST pull-down: GST,全称glutathione-S-transferase,即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,能够和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合,将GSH与琼脂糖珠/磁珠交联可得GSH琼脂糖珠/磁珠。 该实验中使用带有 GST 标签的诱饵蛋白,可以结合到 GSH 琼脂糖珠/磁珠上。当体系中存在能够与诱饵蛋白相互作用的目的蛋...