免疫共沉淀(Co-IP)、GST Pull-Down与蛋白邻近标记技术各有其独特的优势和应用场景,但是也有其局限性。在某些方面这三种实验方法也是相互补充的,在进行研究时首先我们可以通过蛋白邻近标记技术来筛选互作蛋白,然后通过GST pull-down技术验证在体外蛋白质-蛋白质是否互作,最后利用免疫共沉淀(Co-IP)技术验证在体内蛋白质...
Co-IP和GST pull-down实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的。不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围及实验难度上均有差异。 Co-IP 反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行CoIP检测时,样本一般...
2. GST pull-down可检测到利用啮齿动物细胞从组织中获得的细胞匀浆等,而CO-IP主要是进行蛋白免疫染色实验,并且其灵敏度也更高。 3. CO-IP通常只能采用单个抗体,用于检测特定的 相互作用 ,而GST pull-down使用基础载体蛋白质的普遍性使其不局限于特定的相互作用关 系 4. GST pull-down技术虽然是一种较为简单,...
CoIP:CoIP的优点是不需要对目标蛋白质进行特殊标记,可以保持其天然状态。缺点是需要制备特异性抗体,并且可能存在非特异性结合的问题。 综上所述,GST-pull down和CoIP是两种常用的蛋白质相互作用研究技术,它们在原理、目标蛋白质的选择、实验步骤、结果分析和优缺点等方面存在一些区别。研究人员可以根据具体的研究目的和...
辉骏生物专业提供Co-IP免疫共沉淀、GST pull down、RNA pull down、DNA pull down等多种蛋白互作实验,近十年服务经验,客户成果发表在Nature Methods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。自有蛋白质组学平台,对质谱鉴定有十足的把控能力,对后续的生物信息分析有独到的见解;售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保...
#科研[超话]# GST pull-down与co-IP的区别 GST pull-down原理:把GSH与琼脂糖交联形成GSH琼脂糖珠,就能够将带有GST标签的诱饵蛋白固定,当体系中存在与诱饵蛋白有直接相互作用的靶标蛋白时,它就能够与琼脂糖珠...
学习生竞的同学可能都知道,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的技术有很多,比较有代表性的就是Co-IP与GST Pull-down技术,在周周讲第十九期文章中我们也提到过,2018年联赛中出现了免疫共沉淀Co-IP技术7道连选题。那么Co-IP与GST Pull-down技术二者的区别和联系在哪里?
因此,Co-IP可以很好地原位反映蛋白质的真实相互作用。然而,仅使用Co-IP,我们不能确定蛋白质相互作用是直接的还是间接的。通过靶蛋白抗体免疫共沉淀后,得到一种蛋白质复合物,它不仅含有与靶蛋白直接相互作用的蛋白质。 对于GST-pull down测试,我们可以在体外改变实验条件,以消除不相关蛋白质的影响。因此,我们可以很...
Co-IP结果如何看？_Co-IP（免疫共沉淀）与GSTpull-down区别Co-IP是检测分⼦间相互作⽤的常⽤技术，德泰发现有很多实验⼈员反映在查看论⽂⽂献的过程 中，遇到Co-IP实验结果图不知道如何进⾏分析。本⽂从不同的⽂献中找了四个Co-IP的结果 图，⽤案例的⽅式对如何分析Co-IP实验结果图进...
GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和 固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白), 洗脱结合物后通过SDS-...