2. GST pull-down可检测到利用啮齿动物细胞从组织中获得的细胞匀浆等,而CO-IP主要是进行蛋白免疫染色实验,并且其灵敏度也更高。 3. CO-IP通常只能采用单个抗体,用于检测特定的 相互作用 ,而GST pull-down使用基础载体蛋白质的普遍性使其不局限于特定的相互作用关 系 4. GST pull-down技术虽然是一种较为简单,...
Co-IP和GST pull-down都是用于检测蛋白相互作用的实验,两者有很多相似之处,但在原理及实验操作上也存在一定的区别。 本文就Co-IP和GST pull-down在原理及操作流程上的区别做详细的讲解,同时结合文献案例给大家分享CoIP和GST pull-down实验结果的分析方法。 相关推荐:盘点:常用的分子互作实验(科研新人轻松入门) 一...
区别:GST pull-down一般用于体外实验,非生理状态下的验证,蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存在一定差异,一般用于体外验证两个已知蛋白的直接相互作用。co-IP实验反映的是两个蛋白在体内或细胞水平的相互作用,因为在进行co-IP检测时,样本一般源于非变性裂解细胞,活细胞状态下蛋白质之间的相互作用被保持,所以其反映...
从两者的实验原理我们不难发现,gst pull-down和coip实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的;不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围上,以及实验难度...
总体而言,GST pull-down和CoIP实验都是两种比较有效的蛋白互作验证方法,有各自的优势,但也有对应的局限,如果想要拿到一个漂亮并有说服力的实验数据,最好两种实验都能验证一下~ 如果您近期想做GST pull-down和CoIP,但又没有充足的时间,不妨找我们聊聊吧~ 我们将为您提供全程技术支持,确保实验的顺利进行和结果准确...
GST-pull down和CoIP是常用的蛋白质相互作用研究技术,它们在生物科技和药物研发领域中起着重要的作用。GST-pull down和CoIP的主要区别如下: 1.原理: GST-pull down:GST-pull down是一种亲和纯化技术,利用谷胱甘肽S转移酶(GST)标记的蛋白质作为“鱼钩”,结合目标蛋白质的亲和结合区域,通过亲和纯化的方法将目标蛋白...
Co-IP,GST pull down和酵母双杂交是研究蛋白互做最常用的三种方法,一般常用酵母双杂交来筛选,用Co-IP和GST pull down用来验证。研究不仅在整体蛋白层面,还包括蛋白的结构域层面,GST pulldown是用来验证蛋白X与Y是直接结合的,而Y2H和Co-IP结果则还有间接作用以及非特异性作用。
因此,Co-IP可以很好地原位反映蛋白质的真实相互作用。然而,仅使用Co-IP,我们不能确定蛋白质相互作用是直接的还是间接的。通过靶蛋白抗体免疫共沉淀后,得到一种蛋白质复合物,它不仅含有与靶蛋白直接相互作用的蛋白质。 对于GST-pull down测试,我们可以在体外改变实验条件,以消除不相关蛋白质的影响。因此,我们可以很...