综上所述，我们可以发现在植物、动物、植物与线虫互作以及植物与病原真菌互作的研究当中，当需要验证蛋白互作时，基本上都可以利用GST Pull-down实验，这说明GST Pull-down实验在蛋白互作研究中的适用性以及普遍性。同样的，当你需要筛选已知蛋白的未知互作蛋白时，也可以通过GST Pull-down MS技术去实现，此处就不给大...
GST pull down是一种常用的蛋白与蛋白互作实验方法,利用带有标签的已知蛋白作为诱饵蛋白(最常用的是GST标签,即谷胱甘肽巯基转移酶,glutathione S-transferase),诱饵蛋白特异性结合谷胱甘肽亲和树脂,当目的蛋白溶液过柱时,将诱饵蛋白及其相互作用的蛋白复合物捕获。复合物洗脱后,通过蛋白凝胶电泳分析两种蛋白间的相互作用,或者...
GST pull down实验原理和流程利用重组技术将诱饵蛋白与GST（Glutathione S transferase）融合，融合蛋白通过GST与固相化在磁珠上的GTH（Glutathione）亲和结合。因此，当与诱饵蛋白有相互作用的蛋白与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。证明2种已知蛋白间可能存在的相互作用通常采用GST pull down+WB；寻找与已知蛋白发生...
2.Pull down-WB检测 例如: 结果说明:SPX4与PHR2在体外相互作用的pull-down实验。在大肠杆菌中表达并纯化PHR2-His、GST-SPX4和GST,并进行GST拉下实验。分别用GST和His抗体免疫印迹法检测GST/GST-SPX4和PHR2-His蛋白 七、质谱结果 1. 考染结果(质控2) 例如: 结果说明:考染结果显示有差异条带,可进行后续MS...
GST pull-down是体外检测蛋白之间相互作用行之有效的实验方法,可用于验证两种已知蛋白可能存在的直接互作关系(GST pull-down+Western blot);另外,还可以用于寻找可能与目标蛋白存在相互作用关系的未知蛋白(GST pull-down+LC-MS)。 实验流程 GST-A融合蛋白的表达 1. 将目的蛋白与GST重组的质粒转入 BL21菌株中; 2....
GST pull-down实验原理 Pull-down（拉下实验）是一种体外亲和纯化蛋白的技术，Pull-down技术利用被亲和试剂标签（如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素）标记的已知的蛋白特异性识别混合体系中的配体蛋白，以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的，是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。当诱饵蛋白被...
通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并得到含有互作蛋白的胶条；分离后通常质谱检测分析（GST+MS）得到质谱数据，与质谱数据库进行匹配分析从而对互作蛋白进行鉴定，质谱能鉴定到多少蛋白取决于蛋白-蛋白相互结合的强弱、互作蛋白的丰度等。GST pull-down质谱分析是GST融合蛋白Pull-down技术结合质谱联用的蛋白互作...
GST pull-down是利用重组技术将探针蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶蛋白(glutathione-S-transferase,GST)融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合,从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。GST-pull down技术主要在体外验证能和已知融合蛋白相互作用的未知蛋白质,或者两种蛋白之间是否有相互...
是指利用质谱技术对GST pull down实验拉下来的目标蛋白质（也可以是肽）进行质谱分析。在这里，质谱的主要作用是用于目标蛋白质的鉴定或确认。因为质谱可以鉴定已知蛋白也可以鉴定未知蛋白，所以GST pull down实验拉下来的目标蛋白质可以是研究者已知的也可以是未知的。相关服务 GST pull-down蛋白相互作用分析 ...
GST pull-down是利用重组技术将探针蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶蛋白(glutathione-S-transferase,GST)融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的谷胱甘肽(Glutathione,GSH)稳定结合,从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。GST-pull down技术主要在体外验证能和已知融合蛋白相互作用的未知蛋白质,或者两种蛋白之间是否有相互...