GST标签蛋白和HIS标签蛋白的pulldown互作在生物学研究中,了解蛋白质之间的相互作用对于揭示生物体内信号传导、细胞周期调控等方面具有重要意义。GST标签蛋白和HIS标签蛋白的Pull-Down技术是一种常用的研究蛋白...
DNA pull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可...
实验适用于验证两个已知蛋白的互作,或筛选已知蛋白的互作蛋白。具体包括带有GST或HIS标签的重组蛋白,以及总蛋白样品。应用延伸 实验技术不仅可以使用GST标签,还可以使用HiS标签,称为HiS pull-down实验。此外,也可以使用多肽或化合物进行pull down实验,如多肽pull-down或化合物pull-down实验。实验常见问题...
辉骏生物的GST pull-down试剂盒和His pull down试剂盒能够高效调取GST融合蛋白或His融合蛋白在各类样本中的互作蛋白。 在GST pull-down或His pull down实验前,先通过基因工程技术手段将目标基因连入带有GST标签或His标签的原核表达载体中,并导入大肠杆菌中进行原核表达。之后,GST融合蛋白通过GTH( Glutathione)树脂纯化,...
GST标签蛋白和HIS标签蛋白的pulldown互作在生物学研究中,了解蛋白质之间的相互作用对于揭示生物体内信号传导细胞周期调控等方面具有重要意义。GST标签蛋白和HIS标签蛋白的PullDown技术是一种常用的研究蛋白质相互作用的方法。在
GST pull down 实验简介GST pull down是一种常用的蛋白与蛋白互作实验方法,利用带有标签的已知蛋白作为诱饵蛋白(最常用的是GST标签,即谷胱甘肽巯基转移酶,glutathione S-transferase),诱饵蛋白特异性结合谷…
蛋白-蛋白相互作用是蛋白质结构与功能研究中最重要的方面之一。GST Pull-down是一种在试管中检测蛋白互作的方法,其原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用
能用。在Pulldown实验中,诱饵蛋白除了可以带GST标签外,还可以带His标签,也有使用多肽或者化合物进行Pulldown实验的情况。
GST蛋白相互作用pull down案例分析 蛋白A-GST和蛋白B-his、蛋白C-GST和蛋白D-his进行GST Pull-Down实验,来验证蛋白A-GST和蛋白B-his、蛋白C-GST和蛋白D-his是否具有相互作用。GST蛋白作为阴性对照。 实验具体分组可参考如下: 表一 表二 将Input组各样品与GST Magarose Beads反应后,用洗脱液洗脱后,进行WB鉴定...
Pull-down: 该实验使用 GST-Pnsll 作为诱饵蛋白进行 Pull-down 实验,His-Pelo 则作为目的蛋白; 此时Anti-GST、Anti-His 代表分别以 Anti-GST 抗体和 Anti-His 抗体对 Pull-down 处理后的样本进行 WB 检测,条带4处的空白表示 GST 不会与 His-Pelo 结合,而条带3、11则表示沉淀中同时存在 GST-Pnsll 和 ...