GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST（谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase）融合，使其与谷胱甘肽亲和树脂结合，然后在目的蛋白溶液过柱时，便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白，洗脱结合物后通过western blot分析，即可证实两...
GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术,可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST(谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase)融合,使其与谷胱甘肽亲和树脂结合,然后在目的蛋白溶液过柱时,便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白,洗脱结合物后通过western blot分析,即可证实两种蛋白...
GST Pull Down AssayGST Pull Down(A/BB拉A) 1.转染获取目的蛋白A。 2.转化(BL21),挑单克隆,诱导GST、GST-B蛋白表达,超声裂解。 3.Buffer A洗Ni柱与GST Beads,离心(4℃,1000rpm,1min),弃上清,相应加入A(500ul)、GST(200ul)与GST-B(100ul)裂解液,Buffer A补齐至500ul。 4.置于4℃垂直混悬仪上...
实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。 实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合...
基本原理是将靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶)融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽标记的磁珠上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液与之孵育,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目...
GST pull-down一般指用一个带GST标签的重组蛋白，与目的蛋白进行孵育，最后用结合GST的Beads拉下相互作用复合物。\x0d\x0a免疫共沉淀一般是用某一蛋白的抗体，在细胞裂解液中与相应的蛋白结果，用Protein A/G将抗原抗体复合物拉下，最后在拉下的复合物中检测目的蛋白的实验。\x0d\x0a二者都是...
The GST pull-down assay is an intuitive and fast in vitro method for analyzing protein-protein or protein-ligand interactions and is comprised of a "bait" which is a GST-fused protein expressed in E. coli host or a baculovirus expression system and a "prey" which comprises putative binding...
区别是pull-down一般是验证 体外 相互作用；免疫共沉淀一般用于检测细胞水平的 体内 相互作用。
最大的区别就是 GST pull-down技术是利用谷胱甘肽介质和GST融合标签蛋白质之间相互作用结合的。免疫共沉淀技术是利用了Protein A或者G介质和IgG之间相互作用结合的。这是两组不同的配基与蛋白吸附