实验组使用GST-Atrogin-1-wt，在严格控制反应蛋白量的情况下，可以观察到其作用的强弱。在这次实验中，通过GST pull down技术，可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说，实验包括两部分，首先是通过考马斯亮蓝染色观察GST bead与GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt的孵育效果，以及...
为了确定AIB1是否可以直接与NICD结合,将大肠杆菌产生的GST-NICD蛋白与基于大肠杆菌提取物的无细胞蛋白质合成系统产生的AIB1蛋白孵育,进行GST pull down检测是否直接互作。 结果表明,GST-NICD蛋白,而不是GST,能够下调AIB1(图C),表明AIB1可以直接与NICD结合。为了确定AIB1的哪些结构域可以与NICD结合,在293T细胞中表达...
GST pull down实验结果怎么看啊 这张图的主要目的是为了证明GST-Atrogin-1-wt(野生型)和β-catenin在体外的相互作用, 上图是考马斯亮蓝染色的图,看划线的解说,说明实验中是用GST bead与纯化的GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt共同孵育,用孵育后的bead来拉裂解液中的β-catenin 下图免疫印迹的,也就是western blot的...
可以看见GST pull-down实验结果图,与CoIP实验非常类似,主要也分为两部分: Input部分检测未经过GST pull-down处理的样本,也是一种阳性对照。Input部分有三张WB结果: GAPDH代表以GAPDH抗体(anti-GAPDH)检测样本中GAPDH蛋白水平(GAPDH和Tubulin一样,都是常用的内参蛋白),表明四个样本蛋白水平一致; GST-ARF6代表以GST-...
四、假阳性率（False Discovery Rate, FDR）在大规模蛋白质组学研究中，为了控制鉴定结果的质量，通常会设置一定的假阳性率阈值。FDR值越低，说明蛋白质鉴定结果的准确性越高。以上四个参数是解读GST pull-down质谱分析结果的关键，它们共同决定了结果的准确性和可信度。理解这些参数的含义和重要性，对于正确解读实验...
GST Pull-down实验的基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当一种“诱饵蛋白”。作用蛋白溶液过柱后，可从中捕获与之相互作用的“猎物蛋白”（目的蛋白），通过SDS-PAGE电泳结合Western Blot分析洗脱结合物，从而证实蛋白间的相互作用。如果互作蛋白未知，可将洗脱...
GST pull down实验不会做?看过来手把手教你!!!(一), 视频播放量 19142、弹幕量 10、点赞数 560、投硬币枚数 132、收藏人数 926、转发人数 144, 视频作者 金开瑞生物, 作者简介 生物相关干货分享~技术实验、知识科普,应有尽有~,相关视频:GST pull down实验不会做?
GST-pull-down 客户提供 提供样品 1) 构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白(也可由公司构建)或含诱饵蛋白的细胞样品 2) 可用于WB检测和IP实验的GST标签抗体 交付 交付结果 1) 原始数据、结果图片 2) 标准实验报告(含实验步骤、流程及试剂耗材厂家) RNA/DNA pull-down ...
拉下实验（Pull-down）的缺点 1、两个非同一定位的蛋白可能因电荷或是强亲和力的原因造成假阳性，需用其他方法再次验证，例如Co-IP等；2、验证互作是在试管中进行的生化反应，不能够完全反映细胞内蛋白真实互作的状态；3、融合表达的GST标签，肽链较长，可能会改变原目的蛋白的原有的折叠结构。实验信息 实验过程中...