GST pull-down Pull down（拉下实验）是一种体外亲和纯化蛋白的技术，Pull down技术将已知蛋白（诱饵蛋白）利用亲和试剂标签（如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素）进行标记，再特异性识别混合体系中的配体蛋白（靶蛋白），以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的，是在体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力...
GST pull-down 研究对象是蛋白质与蛋白质之间的相互作用。 2、GST pull-down结合原理 GST pull-down利用DNA重组技术将探针蛋白与GST谷胱苷肽巯基转移酶融合。融合蛋白通过谷胱苷肽巯基转移酶与载体上的谷胱苷肽分子特异性亲和原理,从而实现融合的探针蛋白与谷胱苷肽包被的琼脂糖球珠特异性结合。 3、GST pull-dow...
GST Pull-down实验用于研究蛋白之间的直接或间接相互作用，此外还可以结合色谱串联质谱（LC-MS/MS）筛选已知蛋白的未知互作蛋白。由于实验时需要将蛋白在体外纯化出来，因此这种方法属于体外研究蛋白互作的方法。实验原理 GST Pull-down实验的基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲...
GST pull-down技术是体外条件下研究蛋白质相互作用的方法。先将体外表达的GST融合蛋白结合到谷胱甘肽Beads上,再将靶蛋白-GST-Beads和细胞裂解液孵育,这样互作蛋白便一起吸附在Beads上。洗涤掉未结合的蛋白后,再用洗脱液将互作蛋白复合物从Beads洗脱下来,即GST pull down产物。这种互作复合物既可以用Western Blot检测已...
GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。 GST pull-down和与CoIP的区别GST pull-down:原核纯化蛋…
一般来说，GST融合蛋白pull-down方法用于两个方面：一是鉴定能与已知融合蛋白质相互作用的未知蛋白质；一是鉴定两个已知蛋白质之间是否存在相互作用。该方法比较简便，在蛋白质相互作用研究中有很广泛的应用。GST pull-down技术常见问题 GST pull-down技术在体外验证蛋白间直接的相互作用时有较强的特异性，但也存在...
GST pull-down实验原理 Pull-down（拉下实验）是一种体外亲和纯化蛋白的技术，Pull-down技术利用被亲和试剂标签（如谷胱甘肽-S-转移酶、组氨酸六肽、生物素）标记的已知的蛋白特异性识别混合体系中的配体蛋白，以达到富集、分离、纯化某种配体蛋白质的目的，是体外研究蛋白与蛋白相互作用的有力工具。当诱饵蛋白被...
3:2 Pull Down是最常用的Pull Down技术。它使用一个3帧和一个2帧的模式来转换电影帧。 1.首先,将电影的第一帧复制两次,形成一个3帧序列(AAA); 2.然后,将电影的下一帧复制两次,形成一个2帧序列(BB); 3.重复以上步骤,直到整部电影被转换完毕。 这样,24 FPS的电影就可以按照30 FPS的标准进行播放。可以...
GST pull down是一种常用的蛋白与蛋白互作实验方法,利用带有标签的已知蛋白作为诱饵蛋白(最常用的是GST标签,即谷胱甘肽巯基转移酶,glutathione S-transferase),诱饵蛋白特异性结合谷胱甘肽亲和树脂,当目的蛋白溶液过柱时,将诱饵蛋白及其相互作用的蛋白复合物捕获。复合物洗脱后,通过蛋白凝胶电泳分析两种蛋白间的相互作用,或者...