2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 利用绿色荧光蛋白（GFP）在酸性环境中淬灭的特性，研究人员开发出了GFP-LC3工具检测自噬，可使用流式细胞仪定量检测，但使用荧光显微镜检测效果不够理想。2.3.2 RFP-GFP-LC3 在GFP-LC3的基础上，研究人员开发了GFP-RFP-LC3工具，红色荧光蛋白（RFP）在酸性环境中信号稳定。...
自噬流目前常用的检测方法有GFP-LC3-RFP-LC3ΔG。GFP-LC3在自噬溶酶体中很不稳定，而RFP-LC3ΔG则仍可以留在细胞质中，同时观察两种荧光颜色，可以用于监测自噬通量。但是上述这种方法由于需要转染质粒，一方面实验操作麻烦，另一方面也在部分实验中备受限制。之后会为大家详细介绍一种无需转染的自噬流检测方法。通过D...
1. 线粒体自噬的指标除了线粒体自噬受体、线粒体溶酶体共标记、线粒体和LC3共标记,以及一些线粒体功能指标外,还需要检测哪些指标说明线粒体自噬水平?日本有一个线粒体自噬试剂盒靠谱吗?2. 关于RFP-mito tracker和GFP-lyso tracker共染之后,黄色颗粒减少被认为是线粒体自噬减少,但是怎么确定是因为线粒体在溶酶...
2.3.1 GFP-LC3 利用绿色荧光蛋白(GFP)在酸性环境中淬灭的特性,研究人员开发出了GFP-LC3工具检测自噬,可使用流式细胞仪定量检测,但使用荧光显微镜检测效果不够理想。 2.3.2 RFP-GFP-LC3 在GFP-LC3的基础上,研究人员开发了GFP-RFP-LC3工具,红色荧光蛋白(RFP)在酸性环境中信号稳定。报告基因发出红色和绿色的荧光,...
1）Western Blot检测LC3的切割 利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成。自噬形成时，胞浆型LC3会酶解掉一小段多肽形成LC3-I，LC3-I跟PE结合转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。2）在荧光显微镜下采用GFP-LC3单荧光体系/mRFP-GFP-LC3双荧光体系...